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腺相关病毒载体在阿尔茨海默病中应用[摘要] 探讨腺相关病毒载体在阿尔茨海默病中的应用。腺相关病毒载体是目前基因治疗中最常用的病毒载体，由于其具有定点整合、无致病性，通过一系列实验与研究，证明其可长期表达、免疫反应性小等独特的生物学特性。取得较为理想的前临床实验结果，重组腺相关病毒载体的进展为以后基因治疗带来了希望，为将来进入临床治疗打下了良好的基础。 [关键词] 腺相关病毒；阿尔茨海默病；开放阅读框；神经生长因子 [中图分类号] R749.1+6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2011）31-15-02 The Application of Adeno-associated Virus Load in Alzheimer’s Disease GAO Huifang Dehui People’s Hospital in Jilin Province, Dehui 130300, China [Abstract] To explore the application of adeno-associated virus load in Alzheimer?s disease. Adeno-associated virus load is the one which is often used in gene therapy, because it owns the unique biological characteristics of integration on special spot, causing no other side effects. According to the results of a series of experiments and study, it can express itself forever and has little bad immune reaction. Its pre-clinic experimental result is ideal. Its advance of reorganization brings hope to future gene therapy and it lays a solid foundation for future clinic treatment. [Key words] Adeno-associated virus; Alzheimer’s disease; Open reading frame; Nerve growth factor 腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）载体是目前基因治疗中最常用的病毒载体。由于其具有定点整合、无致病性、可长期表达、免疫反应性小等独特的生物学特性，日益受到人们的重视。现针对腺相关病毒的生物学特性和其在阿尔茨海默病中的应用作一综述。 1 AAV的生物学特性 AAV属于微小病毒科、依赖病毒属，直径约25nm，无包膜，呈二十面体对称结构。当有辅助病毒如腺病毒等存在时，AAV才能够进行复制和装配，因而得名腺相关病毒。目前AAV已经有12种人源性血清型（AAV1～AAV12）和110多种非人灵长类动物源性血清型[1]被发现，其中，AAV2是目前研究最为透彻、应用最为广泛的血清型。 AAV2基因组[2]是长4.7kb的线性单链DNA，包含两个开放阅读框（open reading frames，ORFs）。左侧ORF编码复制调节基因rep，可产生4种Rep蛋白，即Rep78、Rep68、Rep52和Rep40。Rep78和Rep68是P5启动子的转录产物，分别通过非拼接和拼接的形式产生，是AAV各生命周期中重要的反式作用因子。在辅助病毒存在时，它们可以促进AAV基因的表达，反之则产生抑制作用，为AAV的复制所必需。由P19启动子转录、分别通过非拼接和拼接形式分别得到Rep52和Rep40蛋白，能够促进单链病毒DNA自聚，以利于其顺利为外壳蛋白所包被。右侧ORF编码cap基因，通过P40启动子转录产物的不同拼接形式，产生3种不同的病毒衣壳蛋白―VP1、VP2和VP3。在AAV2中，三种蛋白以1?1?10的比例构成病毒衣壳。 ORFs两侧为长145bp的反向末端重复序列（inverted terminal repeats，ITRs）。ITRs是AAV的顺式作用元件，其外侧的125个核苷酸呈回文序列，可以通过碱基配对自身折叠形成一个“T”型的发卡结构（T-shaped hairpin structure）。ITRs中含有AAV DNA的复制起始位点（origin），其发卡结构中折叠部分可作为自