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菜花DNA提取和二苯胺检测
实验 菜花DNA的提取及二苯胺检测;一. 实验目的; 二 .实验原理;[二苯胺鉴定DNA的化学原理]
DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛，它再和二苯胺作用而呈现蓝色(溶液呈浅蓝色)。鉴定时溶液蓝色的深浅，与溶液中DNA含量的多少有关。 ;
1．核酸分离提取的原则
1）应保证核酸一级结构的完整性
2）排除其他分子的污染
A． 核酸样品中不应存在对其有抑制作用的有机溶
剂和过高浓度的金属离子
B．其他生物大分子如：排除其他核酸分子的污染;2. 核酸提取的步骤
1）破碎细胞（材料不同，方法不同）
匀浆器，捣碎器，溶菌酶消化，碱裂解等。
2） 除杂质，提DNA
杂质：蛋白，多糖，脂类，DNase, RNA
A. DNase的抑制：EDTA
B.? 除RNA
酶法：加RNase ;调节pH：RNA能在室温条件下被稀碱水解成核甘酸而DNA对碱较稳定，所以提DNA一般要在偏碱的环???中提取，提RNA要在偏酸的环境中稳定。。
调节盐浓度(盐的分步沉淀)：; D. 除糖，脂类
3.DNA提取注意事项
减少物理因素对DNA的降解。动作轻柔缓慢，尽可能不要剧烈振荡或搅拌.
;三.实验试剂;四. 实验步骤;（二） 二苯胺法检测DNA;五.实验结果
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