原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
橡胶树胶孢炭疽菌t-dna插入突变体库构建及其致病缺陷转化子筛选
微生物学通报 JUN 20, 2012, 39(6): 773−780
Microbiology China © 2012 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
研究报告
橡胶树胶孢炭疽菌T-DNA 插入突变体库构建及
其致病缺陷转化子筛选
1,2,3 2 2 1 2 2 2*
蔡志英 林春花 时涛 霍姗姗 蔡吉苗 刘先宝 黄贵修
(1. 海南大学 环境和植物保护学院 海南 儋州 571737)
(2. 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 中国热带农业科学院 海南 儋州 571737)
(3. 云南省热带作物科学研究所 云南 景洪 666100)
摘 要: 【目的】进一步研究橡胶树胶孢炭疽菌致病分子机理。【方法】通过含ILV1 基
因(具氯嘧磺隆抗性) 的pSULF·gfp 双元载体农杆菌AGL-1 介导进行橡胶树胶孢炭疽菌遗
传转化, 利用氯嘧磺隆抗性标记筛选转化子, 对转化子 PCR 验证及荧光显微观察; 采用
离体古铜期橡胶树叶无伤接种法进行致病性缺陷转化子筛选, 并对转化子进行遗传稳定
性检测。【结果】获得含3 721 个转化子的T-DNA 插入突变体库, 转化效率为 150−400 个
转化子/106 孢子, 从3 721 个转化子中筛选得到致病性缺陷转化子25 个; 随机选取20 个
转化子进行遗传稳定性测定, 在不含氯嘧磺隆PDA 平板上继代培养10 次后仍保持氯嘧磺
隆抗性, 且表型稳定, 表明插入外源基因能够稳定遗传。【结论】可以利用根癌农杆菌介
导橡胶孢炭疽菌转化, 构建橡胶树胶孢炭疽菌 T-DNA 插入突变体库, 筛选致病缺陷突变
菌, 为进一步研究该菌致病相关基因提供材料。
关键词: 遗传转化, 插入突变, 致病基因, 炭疽病, 胶孢炭疽菌
Generation of a transformant library of Colletotrichum gloeo-
sporioides by ATMT and screen of the mutants defective in
pathogenicity
CAI Zhi-Ying1,2,3 LIN Chun-Hua2 SHI Tao2 HUO Shan-Shan1
基金项目：国家天然橡胶产业技术体系资金资助项目(No. CARS-34-GW8); 海南大学“211 工程”建设项目课题 ;
海南大学环境与植物保护学院研究生创新平台资助
*通讯作者：Tel: 86-898 : hgxiu@
收稿日期：2011-10-12; 接受日期：2011-11-23
774 微生物学通报 2012, Vol.39, No.6
CAI Ji-Miao2 LIU Xian-Bao2 HUANG Gui-Xiu2*
(1. Environment and Plant Protection College , Hainan University , Danzhou
文档评论（0）