百合多糖提取.pdf

维普资讯 U．SChineseInternationalJournalofTraumatologyJun．2005，Vo1．4，No．2 53 百合多糖的提取及蛋白含量测定 杨华，阮振寰，姚宏 (西安市红十字会医院药剂科 710054) [摘要] 目的：研究百合中多糖的分离提取方法，并测定百合多糖中蛋白的含量。方法：对多糖的分离采用水提醇 沉法，对蛋白的测定用考马斯亮蓝染色法。结果：用考马斯亮蓝法检测蛋白，简便、准确、重现性好。结论：可做为 检测蛋白的方法之一。 [荚键词]百合多糖：百合多糖的提取；考马斯亮蓝法测定 中图分类号：R284．2 文献标识码：A 文章编号：1538—814X(2005)02—0053—02 1 仪器与试药 用固液比1：10，65oc水浴提取 3次，每次2小时，合 721分光光度计(上海第三仪器厂1．，J、型三用水 并水提取液。把合并后的水提液置水浴 65℃减压浓 箱(北京医疗设备厂)；离心机 50周／秒(北京医用离 缩，4℃预冷后加入3倍体积的95％乙醇，产生大量 心机厂)；SHB一3循环水式多用真空泵 (郑州长城科 白色沉淀，3000转离心 15分钟，收集沉淀，取少量 工贸有限公司)：MD100—2上皿电子天平 f上海天平 上清液继续加入95％乙醇，无沉淀产生，说明沉淀 仪器厂)；百合f购于药材公司；属兰州百合，委托西 已完全，将沉淀溶于适当的蒸馏水中。用 1％乙酸将 北大学鉴定)L．davidiiDuchavtre；透析袋 截留分子 溶解液PH调至4．5；用三氯三氟乙烷与seveage法 量8000(华美生物工作中公司)：牛血清白蛋白BSA 联用脱蛋白。加入三氯三氟乙烷冰水浴中搅拌 10 f上海生物制品研究所)；无水乙醇、95％乙醇、浓硫 分钟。3000转离心15分钟。取水相，在水相加入 1／5 酸、乙醚、醋酸、丙酮、氯仿、正丁醇、三氯三氟乙烷、 体积的氯仿，1／25的正丁醇，反复震荡20分钟，3000