三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞株诱导作用的初步研究-上海申康医院.pdf

三氧化二砷对神经母细胞瘤细胞株诱导作用的初步研究 吴伟 邵静波 周君梅 李玲玲 吕志葆 基金项目：上海市科委科研计划课题（12411952405）上海市科委样本库建设平台项目 (12DZ2295006) 作者单位：上海交通大学附属儿童医院 上海市儿童医院普外科（吴伟、邵静波、吕志葆）； 上海市儿童医院中心实验室（周君梅、李玲玲） 通信作者：吕志葆 邮箱 lvzhibao@ 【摘要】 目的体外观察不同浓度的三氧化二砷，在不同的诱导时间作用下，对三种神 经母细胞瘤细胞株分化与凋亡的作用。方法 采用不同浓度 （0 umol/L、1 umol/L、3 umol/L、 5 umol/L、7umol/L ）的砷剂诱导三组神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH、SK-N-BE(2)、SH-SY5Y ， 在同等条件下分别培养24h、48h、72h。采用FISH 荧光原位杂交技术，流式细胞术，CCK-8 细胞增殖活力实验，检测砷剂对三种细胞株的细胞生物学影响。结果 5umol/L 砷剂诱导72h 后，SK-N-BE(2)的MYCN 基因扩增数量明显减少；相较于低浓度（1umol/L）砷剂，随着浓度 的增加，三组细胞细胞增殖活力逐渐降低，SH-SY5Y ，24h （chisq=9.6667,P0.05 ），48h （chisq=9.6667 ，P0.05），72h （chisq=9.5128 ，P0.05）；SK-N-SH ，24h （chisq=10.38 P0.0546，）， 48h （chisq=8.641，P0.05），72h （chisq=9.4615 ，P0.05），SK-N-BE(2)，24h （chisq=8.4359 ， P0.05），48h （chisq=8.641 ，P0.05），72h （chisq=9.5455 ，P0.05 ）；流式结果显示，随着 砷剂浓度的增加，与空白组相比，细胞早晚期凋亡百分比明显增加，凋亡百分比 1.6% （0umol/L ），3.8% （1umol/L），6.1% （3umol/L ），10.4% （5umol/L ），40.2% （7umol/L ）；细 胞周期中G2/M 期延长，细胞分裂受到抑制。结论 1.砷剂对神经母细胞瘤细胞株具有诱导 凋亡，抑制细胞增殖的作用，呈剂量依赖性，不同类型的细胞株对砷剂敏感程度不一。2. SK-N-BE(2)细胞在砷剂诱导后，扩增的 MYCN 基因具有转阴趋势。3.经砷剂诱导后，三组细 胞的细胞周期在S 及G2/M 期受到阻滞，细胞核酸复制及细胞分裂受到抑制。 【关键词】：神经母细胞瘤；砷剂；细胞周期；MYCN The Induced Effect of Arsenic Trioxide On Different Types Of Neuroblastoma Cell Lines Wu Wei，Shao Jingbo ，Zhou Junmei ，Li Lingling ，Lv Zhibao. Shanghai children’s hospital, the Affiliated Hospital of Shanghai Jiaotong University School, General Surgery department of Shanghai children’s hospital . Corresponding author: Lv Zhibao, Email: lvzhibao@ 【Abstract 】 Objective To identify the effect of arsenic trioxide (As O ) on the 2 3 differentiation and apoptosis of different types of neuroblastoma cell lines. Methods The cell lines (SK-N-SH、SK-N-BE(2) 、SH-SY5Y) was induced with different concentrations (0umol/L,1umol/L,3umol/L,5umol/L and 7umol/L) of arsenic trioxide for 24h/48h