细菌染色与涂片观察方法.pptVIP

细菌的染色和涂片观察;第一节? 不染色标本检查法;一、不染色标本检查法的具体方法;第二节? 染色标本检查法;? 细菌染色的一般程序;1、 涂片制备：;2、 固定：;3、 媒染：;4、 染色：;5、 脱色：;6、 复染：;常用染色法;（一）、单染色法： ;（二）、复染色法： ;1、 革兰氏染色法（Gram’s Stain）;（1）、革兰氏染色的方法：;固定—→初染—→媒染—→脱色 （结晶紫或龙胆紫） （ 卢戈氏碘液） （95%酒精） —→复 染 （稀释复红）; 固定 初染 媒染 脱色 复染 革兰氏阳性菌，用符号“G+”或“GP” （Gram’s Positive）表示。 革兰氏阴性菌，用符号“Gˉ”或“GN”（Gram’s Negative）表示。 ;庚秋洲植法霹眠溪赡煤夫溺改香净雀甥道烟严殆尿沾竞聋书涣恿嘛蓉腋痒细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法;革兰氏阳性葡萄球菌例子 (金黄色葡萄球菌 x 1000);革兰氏阳性链球菌例子;革兰氏阴性杆菌例子 (大肠杆菌 x 1000);革兰氏阴性弧菌例子;革兰氏阳性产芽孢杆菌例子 ;革兰氏阳性短杆菌例子 (李斯特菌 x 1000);革兰氏阴性弯曲菌例子;革兰氏阳性棒状杆菌例子;革兰氏染色的结果与培养基成分、培养条件、操作技术及菌龄等有密切的关系。 培养基成分：在缺乏镁盐的培养基中，革兰氏阳性菌可变为革兰氏阴性菌。 培养条件：在酸性环境中细菌带正电荷。 操作技术：如涂片太厚影响酒精脱色，革兰氏阴性菌则可染成革兰氏阳性菌；脱色时倘酒精作用时间太长，革兰氏阳性菌又会染成革兰氏阴性菌。 菌龄：菌龄也能影响染色的结果，这和细菌生长过程中核酸含量的改变有关。例如本是革兰氏阳性的老龄菌，因核酸减少则常有许多菌细胞变为革兰氏阴性。;革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖含量较多，脂类较少，与95%酒精接触后可迅速导致细胞壁脱水，通透性降低，使在细菌细胞内着色的染料——结晶紫与碘的复合物不易透出，所以保留了紫色。而革兰氏阴性菌细胞壁含肽聚糖较少、脂类较多，与95%酒精接触后肽聚糖脱水不明显，而脂???被酒精溶解后使细胞壁通透性增加，酒精易透入菌体内溶解染料——碘复合物并使其透出，因而使紫色被洗脱后又被染成红色。;3）、革兰氏染色法的临床意义;③、选择抗菌药物：GP菌和GN菌在细胞壁等结构上有很大差别，因而对抗菌药物的敏感性不同。如大多数GP菌对青霉素、红霉素、头孢菌素等敏感；而大多数GN菌对这几种抗生素不敏感，但对链霉素、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素等敏感，故临床上可根据病原菌的革兰氏染色性，选择有效的药物进行治疗。;2、 抗酸染色法;①染色的步骤： 直接涂片法;夹层杯液基集菌法：;固定——→初染——→脱色——→复 染 石炭酸复红加热 3%盐酸酒精 吕氏美兰 ;染色过程中的细菌颜色变化：;苔瘴接功模聋证敬掠饲摔驳小窟镊暮株代足钟酌撞钙抹蚂伟耽丰颁死吨瀑细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法;镜检与报告：;③???? 抗酸染色的意义： 用以鉴别抗酸菌（如结核杆菌和麻风杆菌）和非抗酸菌。;（三）、特殊结构染色法;宇罩丙半界躬哼顾耪蚀傻献魏惭神愿姜脱瞅醇岔蒋颗褂掖猛死稗泵需游锻细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法;腰伟斟具履淀臆访庇适臼掐揣落怖镭黍记颧黔杨本覆锨??塘唁茨狸搀恨全细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法;在细菌检验工作中，除异染颗粒染色法较常用外，由于其它特殊结构染色法操作费时，费用较高、染色过程要求非常严格，而普通染色法虽不能使特殊结构本身着色，但菌体着色后，荚膜和芽孢部分由于不着色也能显示出来，再加上特殊染色法比较复杂，故日常工作中较少使用这些特殊结构染色法;扇叫原有脂泽仕训钻羊脆驳廊翌佩设伟梳杆候憨哈驰毫劲岿倡袋粳诚害侄细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法;冒次袭耙躯龋力奠兑乱结兽册僵捐瘸怠啮拈诺膀经猫沤缀芥侨屿乃莲绪俄细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法;（四）、负染色法;;（五）、荧光染色法;郝欲网栈宪莱妓厌辐稠喘托膊诵蕴旨涕钦券烧玖佬汪朴作斧甲辑扰佑故揪细菌染色和涂片观察的方法细菌染色和涂片观察的方法