PCR-ELISA在生物医学中作用.docVIP

PCR-ELISA在生物医学中作用本文作者：闫琳 王晓英 郭云昌 单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所 PCR-ELISA是利用了PCR技术的高敏感性、核酸探针的特异性、酶标仪直接读取结果的客观性等优点建立的一项技术。PCR-ELISA只需要具备PCR仪和酶标仪即可实施，且其灵敏度及特异性均较高，下面就PCRndash;ELISA技术及其在国内外生物医学领域中的应用进行介绍。 1PCR-ELISA技术 聚合酶链反应(PCR)技术自诞生以来，在各个领域都得到了广泛的应用。传统对扩增产物检测的方法主要是凝胶电泳EB荧光显色法，以定性检测为主，只能粗略的相对定量，灵敏度低，易产生假阴性和假阳性结果，另外EB还具有致癌性。NIEMEYER等创建了应用固相捕获的PCR定量技术，即在PCR扩增以后借用酶联免疫吸附试验的原理，使用酶标抗体，通过杂固相或液相杂交来实现定量检测［1］，被称为PCR-ELISA，它弥补了传统PCR检测方法的不足。该检测技术主要包括三个部分，分别为聚合酶链式反应(PCR)、扩增产物与探针的杂交及常规ELISA酶标显色［2］。通常PCR-ELISA技术需要借助生物素-链酶亲和素系统［3］。最初的PCR-ELISA采用夹心杂交法，包括捕获探针，扩增产物和检测探针，后经过改进，在PCR过程中给目的片段掺入标记物，使扩增的产物也具有检测探针的功效，即为直接杂