穴位注射对胆色素结石模型豚鼠肝脏部分酶类影响.docVIP

穴位注射对胆色素结石模型豚鼠肝脏部分酶类影响摘要 将雌性豚鼠４０只随机分成５组，每组８只。正常对照组，每日只喂正常颗粒饲料；造模对照组，每日喂成石饲料，连续喂养６０日；针刺治疗组，造模后，每日电针”膈俞”“肝俞”“阳陵泉”穴；肌肉注射组，造模后隔日非穴位肌肉注射复方当归注射液０.２ｍｌ；穴位注射组，造模后隔日在”膈俞”“肝俞”“阳陵泉”穴穴位注射复方当归注射液。结果，造模组成石率大于正常组、穴注组，穴注组成石率最低；肝总酶各组均明显低于正常组，只有穴注组对Ｋ?＋Ｎａ?＋?ＡＴＰ酶活性较正常组高；同时穴注组对降低ＡＬＴ、ＡＫＰ、５′?ＮＴ及肝组织β?Ｇ、胆汁β?Ｇ效果最好。 主题词胆结石／穴位疗法胆色素类肝／酶学当归注射液／投药和剂量 胆石病是临床常见病，多发病。结石虽发生于胆道系统，但胆汁由肝脏生成，而肝脏分泌的胆汁成分比例异常或胆汁淤滞，导致胆汁成石力增高，是产生胆石病的重要因素之一。本实验采用具有活血化瘀作用的复方当归注射液对胆色素结石模型豚鼠作穴位注射，以便通过对豚鼠肝脏和血清中部分酶类变化的观察，了解该法经改善肝胆系统血液循环和代谢状况，从肝细胞水平调节胆汁生成和分泌，减少胆汁淤滞，逆转成石趋势的机理。 １材料与方法 １.１实验分组 取实验用雌性豚鼠(月龄２～３月，体重２５０±２０ｇ，南京中医药大学实验动物中心提供)４０只，随机分成５组，每组８只，豚鼠每笼饲养４只，先笼养1周以适应环境，然后进入实验状态。药品复方当归注射液(四川雅安制药厂生产)。 (１)正常对照组：每日每只喂正常颗粒饲料５０ｇ，喂养１２０日，分上下午喂，并每日喂适量青饲料。 (２)造模对照组：每日每只喂成石饲料５０ｇ(含正常饲料４５.４３ｇ，致石药物４.５７ｇ--其中酪蛋白１ｇ，蔗糖１.５ｇ，纤维素１ｇ，猪油１ｇ，胆酸０.０２ｇ，胆固醇０.０５ｇ)喂养６０日，后改用正常颗粒饲料喂养６０日，并每日喂适量青饲料。 (３)针刺治疗组：喂养方式同造模对照组，第６１日起，每日用固定器固定豚鼠，针刺一侧”膈俞”“肝俞”“阳陵泉”穴，连接脉冲电针仪通电１５ｍｉｎ，用连续波，频率１６０次／ｍｉｎ，左右侧穴位交替使用，每日１次，１０天为一疗程，疗程间隔２天。 (４)肌肉注射组：喂养方式同造模对照组，第６１日起，每日用固定器固定１５ｍｉｎ，隔日１次用复方当归注射液非穴位肌肉注射０.２ｍｌ。 (５)穴位注射组：喂养方式同造模对照组，第６１日起，每日用固定器固定１５ｍｉｎ，隔日１次用复方当归注射液穴注一侧”膈俞”“肝俞”“阳陵泉”穴，每穴０.２ｍｌ，两侧交替使用。 １.２标本处理 实验结束禁食２４小时，眼眶注射空气处死豚鼠，迅速剖腹取出胆囊，观察有无结石、沉淀及絮状物，用注射器吸出全部胆汁；另抽取心脏血液；低温下切取部分肝脏组织匀浆离心，各标本均置于低温冰箱保存待检。 １.３观察指标及方法 １.３.１按协和医院法作胆石定性并比较各组豚鼠成石情况。 １.３.２肝质膜ＡＴＰ酶活性测定采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒检测。 １.３.３血清谷丙转氨酶(ＡＬＴ）采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒检测。 １.３.４血清碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、５′?核苷酸酶(５′?ＮＴ)采用上海荣盛生物技术有限公司提供的试剂盒检测。 １.３.５肝组织、胆汁β?葡萄糖醛酸苷酶(β?Ｇ)按２?氨基酶葡萄糖醛酸法检测。 ２实验结果 ２.１各组豚鼠成石情况 见表１。 造模组成石率大于正常组(Ｐ＜０．０１）、穴注组(Ｐ＜０.０５)；针刺组和肌注组均大于正常组(Ｐ＜０.０５)；与造模组差异无显著性意义(Ｐ＞０.０５)；穴注组与正常组差异无显著性意义(Ｐ＞０.０５)。只有穴注组的成石率降低有统计意义。 豚鼠胆囊结石外形不规则，呈棕褐色，碾碎后涂在白色滤纸上留有明显的棕黄色素，经红外光谱定性是胆色素为主要成分的胆色素结石。 ２.２对豚鼠肝质膜ＡＴＰ酶活性的影响 见表２。 肝总酶(Ｋ?＋Ｎａ?＋Ｍｇ??２＋??ＡＴＰ酶)：各组均明显低于正常组，其中以造模组最低。Ｋ?＋Ｎａ?＋?ＡＴＰ酶：仅造模组明显低于正常组(Ｐ＜０.０５)；穴注组与针刺组均比造模组提高(Ｐ＜０.０５)，但与正常组比较，仅穴注组明显高于正常组(Ｐ＜０.０５)。Ｍｇ??２＋??ＡＴＰ酶：各组均明显低于正常组(Ｐ＜０.０１)。故各组豚鼠肝质膜ＡＴＰ酶活性比较，只有穴注组Ｋ?＋Ｎａ?＋?ＡＴＰ酶活性的提高具有治疗意义。 ２.３对豚鼠血清ＡＬＴ、ＡＫＰ、５′?ＮＴ的影响 见表３。 ＡＬＴ：造模组显著高于其余4组(Ｐ＜０.０１)，但正常组、针刺组、肌注组、穴注组之间无显著差异。ＡＫ