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生化分析法(熊)
指导老师:张宏
姓名:熊昱;什么叫生化分析;生化分析是进行生命科学研究的一个重要手段,在生物医药研发、临床生化诊断、生化产品生产等领域起着越来越重要的作用,是一门理论与实践相结合的综合性技术。;发展进程;;氨基酸蛋白质的分析方法;1.氨基酸类药物分析 ;1.1柱前衍生法;1.2柱后衍生法;1.3其他衍生方式;;2 酶类分析 ;·;超氧化物歧化酶;【酶活测定】在25℃ 4.5ml 50mmol/L pH8.3的K2HPO4- KH2PO4缓冲液中加入待测SOD样液,再加入10ul 50mmol/L的连苯三酚,迅速摇匀,倒入光径lcm 的比色杯,在325nm波长下每隔30s测一次A值。同时测定Sigma公司的SOD标准品,对所测样品SOD活性进行校正。
【酶活定义】在1ml反应液中,每分钟抑制连苯三酚自氧化速率达50%时的酶量为一个酶活单位, 即325nm 0.035OD/min为一个酶活单位。;;Jones应用硫代氨基甲酰--酪蛋白荧光底物使胰蛋白酶、胃蛋白酶的检测灵敏度提高了几十倍;
张东裔等以对甲苯磺酰基精氨酸甲酯(TAME ) 为底物,以 苯酚红指示剂在特定波长下光吸收值的变化作为测定胰蛋白酶效价的指标, 相对于药典中以消耗氢氧化钠体积为指标,这种方法更加简便灵敏;
此外, 通 过选择不同的底物和指示剂 , 此法还 可用于测定其 它蛋白酶的活性 , 从而建立一 系列以指示剂为基础的酶活性测定方法。;;3 蛋白质多肽类药物分析 ;3.2酶联免疫法,简称ELISA;3.3单克隆抗体检测法;3.4免疫组化;3.5荧光光谱法;3.51内源荧光法;3.52外源荧光法;3.53荧光偏振法;3.54时间分辨荧光光谱法;3.55激光诱导时间分辨免疫分析法;4仪器分析;4.1生化分析仪;4.11功能及特点 ;4.12几种生化分析仪;4.13蛋白质分析;.使用世界上领先的颜色传感器技术判定滴定终点技术,该技术与光电管检测方式相比具有终点判断精确、抗干扰能力强、寿命长、无需将滴定系统置于暗室,操作与观察方便等显著的优点;与电位滴定检测方式相比具有滴定终点无温度漂移,无需预热与校准等明显优势。 .设计严谨,选材严格,确保测试高精度与高回收率 .PC化,网络化优势,仪器具有RS232接口(标配)与无线蓝牙接口(选配),连接电脑由配套的专用数据处理软件??动生成测试信息和全面的检测报告,并有增强型的计算机控制软件可供选购.
;;主要特点:.采用国标规定的检验方法 .大屏幕LCD显示屏,人性化操作界面,使用舒适方便 .自动加吸收液、碱、自动蒸馏,加碱量、加吸收液量大屏幕显示,设置为体积,单位ml,并无需校准,精度高(误差1.5%),操作方便,一目了然. .自动检测液位和补液 .自动检测液温和预热 .蒸汽检测装置自动监测蒸汽压力,保证工作安全 .试管和安全们自动检测系统,有效防止误操作 .循环冷凝水使用德国限流阀,随蒸馏的开启一起动作,自动控制在2.5L/分。 .采用ABS工程塑料机壳,防水、防碱、防电,更适合实验室多水与腐蚀的环境。
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