第3节 遗传密码的破译2017.pptVIP

第3节 遗传密码子的破译 问题探讨 一、遗传密码的阅读方式 二、克里克的实验证据 三、遗传密码对应规则的发现 研究的背景： “中心法则”提出后更为明确地指出了遗传信息传递的方向，总体上来说是从DNA→RNA→蛋白质。那DNA和蛋白质之间究竟是什么关系？或者说DNA是如何决定蛋白质？这个有趣而深奥的问题在五十年代末就开始引起了一批研究者的极大兴趣 1954年美国物理学家伽莫夫G．Gamor对破译密码首先提出了挑战，他设想: 若一种碱基与一种氨基酸对应的话，那么只可能产生4种氨基酸，而已知天然的氨基酸约有20种，因此不可由一个碱基编码一种氨基酸。 若2个碱基编码一种氨基酸的话，4种碱基共有种 不同的排列组合，也不足以编码20种氨基酸。 因此他认为3个碱基编码一种氨基酸的就可以解决问题。虽然4个碱基组成三联密码，经排列组合可产生 种不同形式。要比20种氨基酸大两倍多。 但若是四联密码，就会产生44=256种排列组合。 相比之下只有三联体较为符合20种氨基酸。 42=16 43=64 1954年美国物理学家伽莫夫G.Gamor是第一个提出具体设想的：对破译密码首先提出了挑战。当年，他在《自然Nature》杂志首次发表了遗传密码的理论研究的文章，指出三个碱基构成一个密码子，决定一种氨基酸的可能不止一种密码子。 (1)三联体密码子的提出： 接下来，人们不禁又要问在三联体中的每个碱基作为信息只读一次还是重复阅读呢？以重叠和非重叠方式阅读DNA序列会有什么不同呢？ （2）遗传密码的阅读方式 非重叠阅读方式依次阅读，碱基不重复读取 重叠阅读方式，除首尾碱基外，每个碱基可能读两次 伽莫夫是用数学的排列组合的方法在理论上作出推测的，后来的实验证实这一推测是完全正确的。 思考: 当图中的DNA的第三个碱基T发生改变时，如果密码子是非重叠的，这一改变将影响多少个氨基酸?如果密码子是重叠的，又将产生怎样的结果? (可能影响1个氨基酸) (可能影响3个氨基酸) 遗传密码的阅读方式 2.当图中的DNA的第三个碱基T后插入一个碱基A的话，如果密码子是非重叠的，这一改变将影响多少个氨基酸?如果密码子是重叠的，又将产生怎样的影响？如果插入2个、3个碱基呢? 基因的片段 …GGTTCGCACGCT… 插入1个碱基： …GGTATCGCACGCT… 插入2个碱基： …GGTAATCGCACGCT… 插入3个碱基： …GGTAAATCGCACGCT… 非重叠阅读: 重叠阅读: 当插入1个碱基,将影响插入部位后面所有的氨基酸 当插入2个碱基,将影响插入部位后面所有的氨基酸 当插入3个碱基,将会在原氨基酸序列中多一个氨基酸 遗传密码以哪种方式进行阅读呢？ 插入1个碱基，影响3个氨基酸，多肽比原正常多肽多1个氨基酸 插入2个碱基，影响4个氨基酸，多肽比原正常多肽多2个氨基酸 插入3个碱基，影响5个氨基酸，多肽比原正常多肽多3个氨基酸 二、克里克的实验证据 克里克发现： 增加/删除1个或2个碱基，不能产生功能正常的蛋白质； 但增加/删除3个碱基，可以产生功能正常的蛋白质。 遗传密码中是由3个碱基编码1个氨基酸。 还同时表明: 遗传密码从一个固定的起点开始,以非重叠的方式阅读,编码之间没有分隔符。 这表明： 1961 克里克 以T4噬菌体为材料 说明： 克里克的实验虽然阐明了遗传密码的总体特征，但是，却无法说明由三个碱基排列成的一个密码子对应的究竟是哪个氨基酸。 三、遗传密码对应规则的发现 1961-1962年，尼伦伯格和马太采用了蛋白质的体外合成技术，破译了第一个遗传密码： （1）实验思路：利用蛋白质的体外合成技术，以人工合成的RNA作模板合成多肽，确定氨基酸与密码子的对应关系。 （2）实验步骤： 1）提出大肠杆菌的破碎细胞液加入试管（除去原DNA和mRNA） 2）添加20种氨基酸（分五组，每个试管各加四种氨基酸） 3）加入人工合成的RNA（多聚尿嘧啶核苷酸） 4）合成多肽（只在加入酪氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、丝氨酸的试管中出现多肽链） 5）运用同样方法将上述四种氨基酸分别加入装有多聚U的四个试管（加入苯丙氨酸的试管中出现多肽链） （3）实验结论：尿嘧啶的碱基序列可编码由苯丙氨酸组成的多肽链，结合克里克提出的三个碱基编码一个氨基酸的实验结论，可以得出苯丙氨酸的密码子是UUU。 (1)实验中多聚尿嘧啶核苷酸的作用是什么？ (2)细胞提取液为该实验具体提供了 (3)实验中所用的细胞提取液为什么要除去DNA和mRNA？ (4)为确保实验结论的科学性，应如何设计对照组实验？ 作为模板mRNA直接控制蛋白质(多肽)合成　 能量、酶、核糖体、tRN