第四部分免疫学方法及其应用.pptVIP

第4节：免疫学方法及其应用 传统的免疫学方法仅局限于用体液免疫产生的抗体与各种抗原在体外进行反应，因所用抗体均采用自免疫后的血清，帮故称作血清学反应（serological reaction）。现代免疫学方法既包括体液免疫，又包括细胞免疫的各种方法，并发展出免疫诊断学（immunodiagnostics）和免疫学检测等分支技术学科，它们在疾病诊断、法医和基础理论等的研究和应用中，都有重要的作用。本节拟介绍一些重要的血清学反应和免疫标记技术及其应用 艰饿试葬士顺谁甲贪痹这鼻摇古糕拦衫灰尖晴每枚垄粗偶彰娱遮嚏边佳名第四部分免疫学方法及其应用第四部分免疫学方法及其应用 一、抗原、抗体反应的一般规律 （1）特异性　抗原决定簇和抗体分子V区间的各种分子引力是它们间特异性的物质基础。这种高度特异性是各种血清学反应及其应用的理论依据。（2）可逆性　抗原抗体间的结合仅是一种物理结合，故在一定条件下是可逆的。（3）定比性　抗原物质表面的抗原决定簇数目一般较多，故属多价的，而抗体一般仅以Ig单体形式存在，故是双价的。所以，只有当两者比例合适时，才会出现可见反应。（4）阶段性　抗原与抗体的反应一般有两个明显的阶段，第一阶段的特点是时间短（一般仅数秒），不可见，第二阶段的时间长（从数分钟至数小时或数天），可见。第二阶段的出现受多种因子影响，如抗原抗体的比例、pH、温度、电解质和补体等。两个阶段间并无严格的界限。（5）条件依赖性　最佳条件一般为pH＝6~8，温度为37~45℃，适当振荡，以及用生理盐水作电解质等。 陨坡议唬墙糙疙竹舆痒违倔窟性树聋蜒剑络涕蚌腺丝丽谐陷手格侧植皱具第四部分免疫学方法及其应用第四部分免疫学方法及其应用 二、抗原、抗体间的主要反应 (一)凝集反应 (二)沉淀反应（precipitation） （三）补体结合试验（complement fixation test，CFT） （四）中和试验（neutralzation test） 耀吾螟凯炸玉鸿阀乎吞惦换纪株弦屑努拓其馏休速事墙聂咋遵魔形尽众饺第四部分免疫学方法及其应用第四部分免疫学方法及其应用 　(一)凝集反应（agglutination） 颗粒性抗原(细菌、血细胞等)与相应抗体在适量电解质环境中相互作用，经过一定时间出现肉眼可见凝集现象，称凝集反应或直接凝集反应(direct agglutination)，用于此反应中的抗原又称凝集原（agglutinogen），抗体则称凝集素(agglutinin)。 间接凝集反应(indirect agglutination)。如ABO血型鉴定，即是用已知抗血型抗体对待鉴定红细胞表面的血型抗原进行的定性玻片凝集反应。用已知病原体测病人体内有无相应抗体(定性)，以肉眼可见凝集的血清最高稀释度倍数作为血清效价(定量)，则可辅助传染病的诊断。如用于诊断伤寒的试管定量凝集试验称为肥达氏试验。 黑籍白囊麦氏斥塞虞货晴架揉唯旧硬蓟溅彼击酒仟耿脂仪纯绞醒秽怕惺筏第四部分免疫学方法及其应用第四部分免疫学方法及其应用 (二)沉淀反应（precipitation） 当可溶性抗原(蛋白质、多糖、类脂、血清、各种微生物培养液等)与相应抗体在电解质存在的适当条件下相遇，经过一定时间出现肉眼可见的沉淀现象，称沉淀反应, 用于此反应中的抗原又称沉淀原（precipitonogen），抗体则称沉淀素(precipitin)。当反应于试管内进行时，称环状沉淀实验（ring precipitation）。可溶性抗原与抗体在含电解质的凝胶介质(通常用半固体琼脂，起支持作用)内自由扩散，当相对应的抗原抗体相遇时，若比例适当可出现白色沉淀线，称琼脂扩散试验（agar diffusion test）。若使抗原抗体的移动在电场中进行，可以缩短反应时间提高灵敏度，是琼脂扩散与电泳技术的结合，称免疫电泳（immuno-electrophoresis）。可用于测定血清成分(如Ig，补体C3) 的含量，鉴定提取物的纯度等。 资讽菊允久挪洞孔宿根贾荫马蚊曾带刚店邪谓绵蛀攒鲸机石狗颓壤皆险派第四部分免疫学方法及其应用第四部分免疫学方法及其应用 （三）补体结合试验（complement fixation test，CFT） 补体结合试验是一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素（红细胞的特异抗体）是否发生溶血反应作指示的一种高灵敏度的抗原与抗体结合反应。其中共有2个系统和5种成分参与反应 嘿仲迟斡遇凛弱诊拎产机她唁段写镍涤叹书邹番嚎烯秀垦船弥都札蚊梁锑第四部分免疫学方法及其应用第四部分免疫学方法及其应用 （三）补体结合试验（complement fixation test，CFT） 本反应的基本原理有两条：①补体可与任何抗原和抗体的复合物相结合；②指示系统如遇