企鹅珍珠贝夏季插核试验1.DOC

企鹅珍珠贝夏季插核实验 梁晓春，林冬冬，顾志峰* ( 海南大学海洋学院水产养殖学系，海南海口，570228 ) 摘要：本文对企鹅珍珠贝游离珍珠插核后死亡率与留核率进行了研究，考察了不同珠核大小、不同插核员、珠核的药物处理、不同部位的外套膜小片和不同插核贝的大小等因素对夏季插核的企鹅珍珠贝死亡率、存珠率的影响。结果显示，在夏季不同插核员对企鹅珍珠贝的留核率、死亡率影响不大。育珠贝个体大小、珠核大小、珠核处理对留核率有非常显著的影响。采用药物处理的珠核能明显降低珍珠贝的死亡率和吐核率。同时得出，夏季插核应选用壳高10cm的育珠贝并选用5.8mm或6.0mm的药核进行插核，所得效果最佳。 关键词：企鹅珍珠贝；插核；圆珠；留核率；死亡率 企鹅珍珠贝培养大型游离珍珠在国内仍处于小规模实验阶段，存在死亡率高、留核率低、成珠率低等问题[1-9]。由于企鹅珍珠贝生理结构特殊，不能将马氏珠母贝等其他珠母贝上的成功经验原班照套，而是需要建立企鹅珍珠贝独有的技术和指标。要解决企鹅珍珠贝游离珠培育的关键问题，需要研究影响企鹅珍珠贝死亡率和留核率的环境以及人工因子。优化插核术前处理方式，建立的插核手术贝术后休养方法提高企鹅珍珠贝育珠贝的成活率留珠率和彩虹珍珠质量。 1 材料与方法 1.1 实验地点 实验在海南省陵水县的黎安港进行。黎安港位于北纬18°22′–18°26′，东经110°02′–110°04′，是个不规则的狭长泻湖，，由一个约60m宽的潮汐汊道与外海相通，全年平均风速为3.9±0.7m/s，盐度为31–34‰[]。 材料与方法 .1 材料 1.1 插核母贝 实验用企鹅珍珠贝选择贝壳完整无缺，腹缘有新生鳞片，外面黑色角质层无严重剥落现象，无寄生穿孔海绵，生殖腺尚未成熟或已排完精卵的成贝插核用贝的个体大小壳长10mm（1龄）与15mm两种。贝被选好后逐一清理，切除足丝棒， 2.1.2 珠核 海水贝壳切块后经研磨、抛光并用特定孔径的筛子筛过，本实验采用的珠核有5.45-5.75（1.8）、5.757-6.06mm（1.9）、6.06-6.36mm（2.0）、6.363-6.66mm（2.1）、6.666-6.96mm（2.2）五种，使用前清洗，保持珠核干燥。 .1.3 珠核药物处理 本实验采用盐酸四环素和明胶处理珠核，即成为“药核”。白核不做处理，洗净晾干后备用。 2.1.4 笼具 术前处理笼、休养笼、锥形笼。 .1.5 吊绳 长.2 方法 .2.1 实验设计1 不同插核员企鹅珍珠贝留核率、死亡率的影响选插核员，珠核直径5.757-6.061.9）的白核。每个插核员插核240个，在一天内完成。术后90天统计死亡率和留核率和成珠率。以确定不同插核人员，对企鹅珍珠贝死亡率和留核率的影响。 2.2.1.1 术前处理 选用壳高为10cm规格的企鹅珍珠贝，将，清洗干净,移至低水温海底吊养，抑制母贝的活力，阻止其生殖腺再度发育和成熟。吊养笼为方形, ，吊养水深3m左右，笼间距50cm，行间距。每笼只。 .2.1.2 栓口 将贝从海区取回,阴干待自然开口后用木塞栓口，企鹅珍珠贝闭壳肌十分有力，不要用开口钳强行开口，以免损伤贝体及破坏贝壳。 .2.1.3 制作细胞小片 用解剖刀切断闭壳肌，再打开贝壳将鳃拨开,然后切下由唇瓣下方至肛门腹面的外套膜。以外套膜的色线为基准，采用线外4线内6的比例将外套膜小片切成约2mm*2mm的正方型。小片其边缘应占珠核的1/3为宜。将外套膜小片切成正方形后用脱脂棉沾海水擦拭，后置于塑料板上使用红汞水配成3%的海水溶液,处理1—2分钟。小片应在40分钟内用完。 .2.1.4 药核的处理 将盐酸四环素和明胶按一定比例混合，加入适量无菌水加热搅拌过夜。将珠核至于烘干箱调整温度至60℃加热，待溶液完全混合且珠核变烫后趁热将混合液均匀的喷洒在干燥的珠核上。带无菌手套轻轻擦抚珠核，并用吹风机吹干，制作好的珠核应呈金黄色，颜色均匀外表无凸起和异物。 2.2.1.5 插核 插核选用表面贴片插核法，先将栓口的母贝，右壳向上，左壳向下，置于插核台上，用平板针拨开母贝右核边的鳃叶，清理粘液和污物后，在足的基部和软体部交界线上用切口刀横切一刀，接着将通道针插进切口，分别沿着“左袋”和“右袋”方向拨通送核道，用送核器分别将珠核送到核位。贝体右侧核位插完后立即将手术贝反转过来，即母贝右壳向下，左壳向上，在贝体的左侧足的基部黑白交界处切口，并用通道针从切口向“下足”拨通送核道，接着以右手拿针压住手术贝的足，左手抓送核器将小核送到“下足”部位。每个核位送核之后，立即用送片针把一块细胞小片送贴于核面上。每组300个贝，每组在一天之内插完并分别编号。手术完毕取出木塞，将