不同方法从大豆不同组织中提取基因组DNA效果的比较.pdfVIP

第27卷 第1期 大 豆 科 学 V0L 27 No．1 2008篮 2月 SOYBEAN SCIENCE Feb． 2o08 不同方法从大豆不同组织中提取基因组DNA效果的比较 王振东，孙 仓，王 惠 (沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳1 10161) 摘 要：从大豆组织中获得高质量和足够产量的基因组DNA，是进行大豆分子生物学研究的基础。为进行大豆基 因组的PCR，RAPD，SSR等分子生物学研究，分别以大豆种子和其叶片为实验材料，采用改良的SDS法和CTAB法 对大豆基因组DNA进行了提取。对DNA的提取效果，采用紫外分光光度检测、琼脂糖凝胶电泳分析及DNA的限 制性内切酶图谱分析进行了综合比较。结果表明，在以叶片为材料时，SDS法和CTAB法的大豆基因组DNA的提 取效果差别不大，SDS法稍好于CTAB法。在以大豆种子为材料时，SDS法的提取效果明显优于CrAB法，SDS法可 从大豆种子中提取到能够充分满足各种分子操作的高质量和数量的大豆基因组DNA。 关键词：大豆基因组DNA；提取；SDS法；CTAB法 Comparison of the Genomic DNA Extraction Methods From Soybean Different Tissues WANG Zhen—dong，SUN Cang，and WANG Hui (Science and Technology Department of Shenyang A cultural University，Shenyang 110161，Liaoning，China) Absteact：It is important to extract hi gh quality and sufficient yield of genomic DNA for soybean molecular biological re— search．In order to study the soybcan genome by PCR，RAPD，SSR etc．，improved SDS and CTAB method were used to ex- tract the soybean genomic DNA from the soybcan seeds and leaves．The DNA extraction effect of two difierent methods was compared by ultraviolet spectrophotometry，agarose electroforesis and the restriction enzyme digestion．The results showed that the extraction effect of the SDS method and the CTAB method to soybean genomic DNA was not obviously different for soybean leaves．However，the extraction effect of SDS method is much better than CTAB method for soybean seeds．The con— clusion is that the SDS method is able to extract high quality and quantity soybean genomic DNA，which is suitable for vari- OUS molecular operations． Key words：Soybean genomic DNA；Extraction；SDS method；CTAB method 核酸提取是分子生物学实验的基础，对于其下 酚类、脂类、糖类、色素以及其他干扰物质，需要采用 游工作是非常重要的。高质量的核酸是PCR、实时 合适的提取方法才能得到符合要求的DNA(杨婉身