广西沙田柚变异类型遗传多样性探析.pdf

广西沙田柚变异类型遗传多样性分析 专业名称：生物化学与分子生才勿学 申请人：梁锋 指导教师：陈国平研究员 论文答辩委员会 主席： 委员 广西沙田柚变异类型遗传多样性分析删 研究生：梁锋 年级：201l级 导师：陈国平研究员 学科专业：生物化学与分子生物学 研究方向：分子系统学 摘要 沙田柚原产于广西容县沙田村，至今已有200多年的栽培历史。目前，全国沙田柚种 植面积约占柚类总面积的一半以上。沙田柚为单胚性植物，在引种栽培过程中，由于实生 变异和受自然环境的影响，出现了变异品系和变异单株。沙田柚变异类型的遗传多样性研 究是评价和利用沙田柚种质资源的基础，对优良基因筛选和新品培育等方面具有重要意 义。 分子标记技术从叶绿体基因组水平上和核型分析从染色f．本的形态水平进行遗传多样性分 析。 利用SPJkP分子标记对核基因组进行遗传多样性研究中，共筛选得到63对多态性引 物，各对引物扩增稳定的条带数为2-9条，总扩增带数为252条，平均每对引物扩增带数 为4条；其中，多态性条带数为129条，平均每对引物扩增获得2条多态性条带，各对引 物多态性条带比率为25％．100％，平均每对引物获得的多态性条带比率为50．33％。利用 63对多态性引物对30个沙田柚种质进行遗传多样性研究，结果表明：30个沙田柚种质遗 传相似系数在0．6．1之问，在相似系数为0．6时，夏河龙沙田柚与其他29个种质分开，独 群包含了10个广西地方沙田柚种质、3个广西地方疑似变异单株、四川合江柚、重庆冬瓜 圈和江津古老钱，第11个组群包含长寿2号、菊花心等5个重庆地方品种，其他9个组群 分别只包含1个沙田柚种质。 利用cpSSR分子标记对叶绿体基因组进行遗传多样性研究中，在54x,J‘cpSSR引物中， 能扩增出稳定条带的有24对，但这24对引物在30个沙田柚种质中未扩增出差异性条带。 叶绿体基因组序列相对保守，30个沙田柚种质的叶绿体基因组在24个基因位点未检测到 差异条带，原因可能为：1、30个沙田柚种质的胞质为同一单倍型：2、本研究中检测位点 有限，未能检测到变异位点等。 在核型分析研究中，30个沙田柚种质染色体都由中部着丝点染色体与近中部着丝点染 色体组成，中部着丝点染色体数目和近中部着丝点染色体数目相差不大；种质问核型不对 2A，也有部分为1B和2B，各种质染色体相对长度组成在4个等级中基本都有分布；30 间，平均为1．87：二维进化趋势分析显示，进化程度较高的是江津古老钱和太极图柚，进 化程度较低的是早熟柚和古老钱。30个沙田柚种质核型分析聚类结果表明：30个沙田柚 类和第Ⅳ类所包含的种质数目最多，其它类群种质数目较少，聚类距离最小的是种质早熟 沙田柚和夏河龙，种岭南沙田柚和北碚柚，容县小果型变异和恭城狮子沙田柚之间，它们 问的距离只有0．1；聚类距离最大的是容县本地沙田柚2与兴坪沙田柚2、容县本地沙田柚 本地沙田柚2单独分成一类，说明容县本地沙田柚2可能发生了比较明显的染色体变异。 SRAP分子标记和核型分析遗传多样性分析结果表明：30个沙田柚种质问的遗传距离 比较小，两种分析方法可以一定程度的相互应证，但也存在不一致性。总体上，广西本地 沙田柚种质问遗传距离较近。 关键词：沙田柚；遗传多样性分析；分子标记；核型分析 onGenetic inShatianPoreelo Analysis Diversity Master 11 researcher Grade：20 Candidate：LiangFeng Supervisor：ChenGuoping andmolecular Researchdirection：Molecular Major：Biochemistry