2017年江苏省启东市高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离（第2课时）凝胶色谱法基础知识练习 新人教版选修1.docVIP

基础知识：凝胶色谱法 1． A． C． 2． (　　) A． B． C． D． 3． A． B． C． D． 4． A． B．PCR中，引物的结构和长度决定DNA子链从3′端向5′端延伸 C． D．Taq DNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列 5． A． C． 6． A． B． C． D．,从而影响其移动速率 7． A． C． 8． （l）玫瑰精油称为“液体黄金”，是世界香料工业不可取代的原料，提取出的玫瑰精油要 求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是 ． （2）杏仁油富含矿物质和维生素，是一种质地轻柔、高渗透性的保温剂，主要通过 法提取． （3）血红蛋白的提取方法可以采用 ，该方法主要是利用血红蛋白的 特性将它与其他物质分开的． （4）提取胡萝卜素的主要步骤： ①选取500g新鲜的胡萝卜，用清水洗净，沥干、 ，然后在40℃的烘箱中烘干，时间约需2h，将干燥后的胡萝卜进一步粉碎过筛．注意胡萝卜的粉碎一定要彻底，主要目的是 ． ②将样品放入500mL圆底烧瓶中，加入200mL萃取剂混匀，用萃取方法提取，萃取30min，然后过滤萃取液，除去固体物质，萃取的效率主要取决于 ． ③用蒸馏装置，对萃取的样品进行 ． ④收集接收器中的样品． 9． pH时，蛋白质可因内部酸性或碱性基团的解离程度相等而呈等电状态，这时溶液的pH叫做蛋白质的等电点。不处于等电点状态的蛋白质分子的正、负电荷量是不相同的。试回答下列问题。 (1)多数蛋白质的等电点近于5，一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点________(“偏高”还是“偏低”) (2)根据等电点的不同，可用________方法将不同种类的蛋白质分子分开。 (3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。 ____________________________________________________________________。 (4)在血红蛋白提取和分离实验中，对分离得到的血红蛋白溶液要进行透析，除去相对分子质量较小的杂质蛋白质。请利用所给的实验材料对该透析实验进行验证。 实验目的：验证透析的基本原理和操作。 实验原理： ①__________________________________________________________________； ②__________________________________________________________________。 实验材料：①透析管或透析袋　②烧杯　③玻璃棒 ④电磁搅拌器　⑤试管及试管架 实验试剂：①1 mL血红蛋白溶液　②300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0) 实验步骤： ①__________________________________________________________________； ②__________________________________________________________________。 10． A、B两种蛋白质，请运用凝胶色谱法完成下列实验，确定A、B两种蛋白质相对分子质量的大小。 (1)凝胶色谱法的原理是____________________________________________。 (2)材料用具：玻璃器，橡皮塞，打孔器，移液管，尼龙网，螺旋夹，凝胶，缓冲液。 (3)实验步骤 ①凝胶色谱柱的制作：注意底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的_____，否则难以铺实_____，还会导致液体残留，蛋白质分离不彻底。 ②凝胶色谱柱的装填：装填凝胶柱时，不得有气泡存在的原因是： ___________________。 ③样品的加入和洗脱：_____________________________________________。 (4)预期结果及结论：______________________________________________。 参考答案： 1． 答案： 解析： 2． 答案： 解析： 3． 答案： 解析： 4． 答案： B 解析： DNADNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，且和引物的结构和长短没有关系。 5． 答案： 解析： 6． 答案： 解析： ,较小的蛋白质分子进入凝胶内部,所经过的路径长,所以洗脱出来较慢,而较大的蛋白质分子则相反,并且,由于凝胶种类多,孔径大小不同,可进一步改变进入凝胶内