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蛋白质生物合成和修饰
蛋白质的生物合成(翻译)Protein Biosynthesis,Translation;蛋白质的生物合成,即翻译,就是将核酸中由 4 种核苷酸序列编码的遗传信息,通过遗传密码破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。;蛋白质合成体系Protein Biosynthesis System ;20种氨基酸(AA)作为原料
酶及众多蛋白因子,如IF、eIF
ATP、GTP、无机离子;一、翻译模板mRNA及遗传密码;原核生物的多顺反子; mRNA上存在遗传密码;遗传密码表;从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 ;1. 连续性(commaless);基因损伤引起mRNA阅读框架内的碱基发生插入或缺失,可能导致框移突变(frameshift mutation)。 ;2. 简并性(degeneracy);2. 简并性(degeneracy);3. 通用性(universal);4. 摆动性(wobble);U;密码子、反密码子配对的摆动现象;二、核蛋白体是多肽链合成的装置;;核蛋白体的组成;原核生物翻译过程中核蛋白体结构模式:;三、tRNA与氨基酸的活化;tRNA的三级结构示意图;氨基酸 + tRNA;第一步反应;第二步反应; tRNA与酶结合的模型;氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。
氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。
氨基酰-tRNA的表示方法:
Ala-tRNAAla
Ser-tRNASer
Met-tRNAMet ;真核生物: Met-tRNAiMet
原核生物: fMet-tRNAifMet;蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis ;翻译的起始(initiation)
翻译的延长(elongation)
翻译的终止(termination );一、肽链合成起始;原核、真核生物各种起始因子的生物功能 ;(一)原核生物翻译起始复合物形成;IF-3;;S-D序列 ;IF-3;IF-3;IF-3;(二)真核生物翻译起始复合物形成;;二、肽链合成延长;延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF)
原核生物:EF-T (EF-Tu, EF-Ts)
EF-G
真核生物:EF-1 、EF-2
;原核延长因子;又称注册(registration);延长因子EF-T催化进位(原核生物) ;顺攘盟炔障嗓耶刁豫囊坦刽韵郸诣唁谁购堰度镇布赛彻肠唁鹃侨宙窿加急蛋白质的生物合成与修饰蛋白质的生物合成与修饰;Tu;(二)成肽;(三)转位;fMet;进位;真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。
另外,真核细胞核蛋白体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。; 三、肽链合成的终止;终止相关的蛋白因子称为释放因子
(release factor, RF) ;原核肽链合成终止过程 ;;多聚核蛋白体(polysome);电镜下的多聚核蛋白体现象;蛋白质合成后加工和输送Posttranslational Processing Protein Transportation;从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性,必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。;一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质;几种有促进蛋白折叠功能的大分子;1. 热休克蛋白(heat shock protein, HSP)
HSP70、HSP40和GreE族
2. 伴侣素(chaperonins)
GroEL和GroES家族;热休克蛋白促进蛋白质折叠的基本作用——
结合保护待折叠多肽片段,再释放该片段进行折叠。形成HSP70和多肽片段依次结合、解离的循环。 ;伴侣素GroEL/GroES系统促进蛋白质折叠过程 ;蛋白二硫键异构酶 ;肽-脯氨酰顺反异构酶 ;二、一级结构的修饰;鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰;三、高级结构的修饰;蛋白质合成后需要经过复杂机制,定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位,这一过程称为蛋白质的靶向输送。 ;所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号,主要为N末端特异氨基???序列,可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位,这一序列称为信号序列 。 ;靶向输送蛋白;(一)分泌蛋白的靶向输送;信号肽的一级结构;信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 ;(二)线粒体蛋白的靶向输送 ;(三)细胞核蛋白的靶向输送;蛋白质生物合成的干扰和抑制Interfere
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