胰蛋白酶的活力的测的定.pptVIP

胰蛋白酶的活力的测定;二、酶的化学组成;三、酶的活性中心 ????必需基团 酶分子中与催化作用直接相关、不可缺少的化学基团。 ????活性中心 酶分子中必需基团相对集中，构成一定空间结构区域，与催化作用直接相关。 ????;用于判断和确定酶活型中心的主要方法： 1、专一性研究 通过研究酶的专一性底物的结构特点，来判断 和确定活性中心的结构特点。 2、酶侧链基团的化学修饰法 酶分子中可以被化学修饰的基团 很多，如巯基、羟基、咪唑基、氨基及羧基 等。;四、酶的命名与分类 习惯命名法 ????按催化反应类型分类?? 脱氢酶、脱羧酶、连接酶、聚合酶等。 ????按组织来源及性质分类?? 胃蛋白酶/胰蛋白酶，酸性/碱性磷酸酶等。 国际系统分类; 酶原与酶原激活 无活性的酶前身???称酶原。由无活性酶原转变为有活性酶的过程称酶原激活。 ????同工酶 分子结构不同、理化性质也不同，但催化同一化学反应的一组酶，如乳酸脱氢酶（LDH）。 ????别位酶 多亚基组成，其中有催化亚基、有调节亚基，小分子化合物结合调节亚基后分子构象改变，引起催化活性改变。 ;五、酶的活力测定 ;胰蛋白酶活力单位的定义规定为：以BAEE为底物反应液pH8.0，25℃，反应体积3.0ml，光径1厘米的条件下，测定?A253，每分钟使?A253增加0.001，反应液中所加入的酶量为一BAEE单位。 ;初速度 研究酶反应的动力学以酶促反应的初速度为准;;操作方法 取2个光程为1厘米的带盖石英比色杯，分别加入25℃予热过的2.8ml底物溶液。向一只比色杯中加入0.2ml 0.001mol/L HCl，作为空白，校正仪器的253nm处光吸收零点。再在另一比色杯中加入0.2ml待测酶液，立即混匀并记时，每半分钟读数一次，共读3~4分钟。 绘制酶促反应动力学曲线，从曲线上求出反应起始点吸光度随时间的变化率（即初速度）?A253/min。 ;样品胰蛋白酶BAEE活性单位＝