生物化学第十章DNA的生物合成.docVIP

第十章?DNA的生物合成? 一、遗传学的中心法则和反中心法则：? DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代；通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。DNA的复制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中心法则。但在少数RNA病毒中，其遗传信息贮存在RNA中。因此，在这些生物体中，遗传信息的流向是RNA通过复制，将遗传信息由亲代传递给子代；通过反转录将遗传信息传递给DNA，再由DNA通过转录和翻译传递给蛋白质，这种遗传信息的流向就称为反中心法则。? 二、DNA复制的特点：? 1．半保留复制：DNA在复制时，以亲代DNA的每一股作模板，合成完全相同的两个双链子代DNA，每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链，这种现象称为DNA的半保留复制(semiconservative?replication)。DNA以半保留方式进行复制，是在1958年由M.?Meselson?和?F.?Stahl?所完成的实验所证明。? 2．有一定的复制起始点：DNA在复制时，需在特定的位点起始，这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段，即复制起始点（复制子）。在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。? 3．需要引物(primer)：DNA聚合酶必须以一段具有3端自由羟基（3-OH）的RNA作为引物，才能开始聚合子代DNA链。RNA引物的大小，在原核生物中通常为50～100个核苷酸，而在真核生物中约为10个核苷酸。? 4．双向复制：DNA复制时，以复制起始点为中心，向两个方向进行复制。但在低等生物中，也可进行单向复制。? 5．半不连续复制：由于DNA聚合酶只能以5→3方向聚合子代DNA链，因此两条亲代DNA链作为模板聚合子代DNA链时的方式是不同的。以3→5方向的亲代DNA链作模板的子代链在聚合时基本上是连续进行的，这一条链被称为领头链(leading?strand)。而以5→3方向的亲代DNA链为模板的子代链在聚合时则是不连续的，这条链被称为随从链(lagging?strand)。DNA在复制时，由随从链所形成的一些子代DNA短链称为冈崎片段(Okazaki?fragment)。冈崎片段的大小，在原核生物中约为1000～2000个核苷酸，而在真核生物中约为100个核苷酸。? 三、DNA复制的条件：? 1．底物：以四种脱氧核糖核酸(deoxynucleotide?triphosphate)为底物，即dATP，dGTP，dCTP，dTTP。? 2．模板(template)：以亲代DNA的两股链解开后，分别作为模板进行复制。? 3．引发体(primosome)和RNA引物(primer)：引发体由引发前体与引物酶（primase）组装而成。引发前体是由若干蛋白因子聚合而成的复合体；引物酶本质上是一种依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP）。? 4．DNA聚合酶（DNA?dependent?DNA?polymerase,?DDDP）：? 种类和生理功能：在原核生物中，目前发现的DNA聚合酶有三种，分别命名为DNA聚合酶（pol?），DNA聚合酶（pol?），DNA聚合酶（pol?），这三种酶都属于具有多种酶活性的多功能酶。pol?为单一肽链的大分子蛋白质，具有5→3聚合酶活性、3→5外切酶活性和5→3外切酶的活性；其功能主要是去除引物、填补缺口以及修复损伤。pol?具有5→3聚合酶活性和3→5外切酶活性，其功能?不明。pol?是由十种亚基组成的不对称二聚体，具有5→3聚合酶活性和3→5外切酶活性，与DNA复制功能有关。? 在真核生物中，目前发现的DNA聚合酶有五种。其中，参与染色体DNA复制的是pol?α（延长随从链）和pol?δ（延长领头链），参与线粒体DNA复制的是pol?γ，polε与DNA损伤修复、校读和填补缺口有关，pol?β只在其他聚合酶无活性时才发挥作用。? DNA复制的保真性：为了保证遗传的稳定，DNA的复制必须具有高保真性。DNA复制时的保真性主要与下列因素有关：遵守严格的碱基配对规律；在复制时对碱基的正确选择；对复制过程中出现的错误及时进行校正。? 5．DNA连接酶(DNA?ligase)：DNA连接酶可催化两段DNA片段之间磷酸二酯键的形成，而使两段DNA连接起来。该酶催化的条件是：?需一段DNA片段具有3-OH，而另一段DNA片段具有5-Pi基；?未封闭的缺口位于双链DNA中，即其中有一条链是完整的；?需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由ATP供能。? 6．单链DNA结合蛋白（single?strand?binding?protein,?SSB）：又称螺旋反稳蛋白（HDP）。这是一些能够与单链DNA结合的蛋白质因子。其作用为：稳定单链DNA，便于以其为模板