原发性阑尾腺癌的临床病理学特征及微卫星不稳定性研究.docVIP

　　原发性阑尾腺癌的临床病理学特征及微卫星不稳定性研究 --《中国结直肠癌诊断规范(2015版)》提出当确诊为结直肠癌时,建议检测DNAMMR蛋白(MHL1,MSH2,MSH6及PMS2)及Ki67的表达情况来鉴定微卫星不稳定性#65377;MSI的状态对结直肠癌患者是否接受5-FU辅助化疗非常重要#65377;而有关原发性阑尾腺癌的MSI状态报道非常少见#65377;阑尾原发性腺癌是一种胃肠道罕见的恶性肿瘤,占所有阑尾切除标本的0.2%~0.3%#65377;多数患者多是因急性阑尾炎而手术,部分表现为腹部或盆腔包块#65377;有关阑尾腺癌的临床病理特征对患者的临床治疗及预后观察均有重要的意义#65377;我们拟回顾性分析我院2005年1月至2014年12月期间诊断的18例原发性阑尾腺癌的临床病理特征及微卫星不稳定的状态#65377; 1材料和方法 1.1标本及随访 标本收集自赤峰市医院2004年12月至2015年1月18例阑尾手术切除标本,术后经病理证实为阑尾原发性腺癌#65377;所有病例标本经福尔马林固定后,石蜡包埋,连续切片,4μm厚,并经苏木素-伊红(HE)染色#65377; 1.2试剂 所有的鼠抗人单克隆-抗抗体试剂盒MHL1(克隆号:G168-15)#65380;MSH2(克隆号:25D12),MSH6(克隆号:44)及PMS2(克隆号:MOR4G)#65380;SP试剂盒#65380;3,3-二氨基联苯(DAB)染色液均购自福建迈新生物技术公司#65377; 1.3免疫组织化学染色方法 采用EnVision二步法,简述如下:切片脱蜡#65380;水化,3%H2O2阻断内源性过氧化物酶活性,采用高压锅法进行抗原修复(MSH2采用pH9.0,柠檬酸热修复,其余3种抗体采用pH9.0,EDTA抗原修复液修复;高压锅将修复液加热至冒气,2min,然后冷水冲洗锅体至室温,取出切片,PBS液洗待用)#65377;正常血清孵育,甩去不洗,滴加抗人抗体MHL1#65380;MSH2,MSH6及PMS2,均为工作液,4℃过夜#65377;滴加EnVision二抗#65377;DAB显色#65377;苏木素复染,脱水#65380;透明#65380;封片#65377;以磷酸盐缓冲液(PBS)#65380;同型小鼠IgG代替一抗作为阴性对照#65377; 1.4结果判断 MHL1#65380;MSH2,MSH6及PMS24种抗体阳性着色部位均为细胞核#65377;免疫组化染色阳性标准:至少有肿瘤细胞斑片状的核着色,即认为MMR蛋白完整;阴性标准:肿瘤细胞的细胞核完全不着色,而内对照(如间质细胞#65380;淋巴细胞或非肿瘤性的隐窝上皮细胞)阳性着色,即认为MMR蛋白缺失#65377;MHL1#65380;MSH2,MSH6及PMS2任一蛋白丢失即可确定为MSI-H#65377; 2结果 2.1 18例原发性阑尾腺癌的临床病理特征 18例原发性阑尾腺癌,其中男女各9例,年龄60岁及以下的共7人,大于60岁的60人,伴发急性阑尾炎的7例;病理类型共3型,其中以结肠型为主,共12例,黏液腺癌4例,印戒细胞癌2例,分化程度以中低分化为主,共13例,肿瘤T分期以T2为主,共10例,其中1例黏液腺癌伴有局限于右下腹黏液侵犯,共有6例病人发生淋巴结或远处转移,其中1例结肠型腺癌伴有肝转移#65377; 2.2 18例不同组织学亚型的阑尾腺癌的MMR的免疫组化表达状态 免疫组化的结果显示,18例原发性阑尾腺癌,仅1例病人有MMR的丢失:此例病人为41岁男性患者,以右下部疼痛起病,CT显示右下腹包块及肠套叠,无特殊病史,病理类型为低分化黏液腺癌,MMR蛋白显示MSH2/MSH6表达缺失,显示为MSI-H#65377; 2.3文献报道的伴有 MSI-H的阑尾肿瘤病例迄今为止文献共报道伴有MSI-H的病人共8例#65377; 3讨论 原发性阑尾恶性肿瘤的发病率非常低,男性较女性多见,中位年龄在50~70岁,多数都是因为急性阑尾炎手术或其他的手术在术中偶然发现#65377;本组研究中男性与女性患者发病人数相同,平均年龄为61.7岁,其中7例患者(38.78%)伴有急性阑尾炎,其中1例病人因肠套叠而行右半结肠切除术,术后病理检查才发现为阑尾原发性腺癌#65377;阑尾原发性腺癌中以阑尾黏液腺癌的病理类型最为常见,印戒细胞癌的比例最低,梁建伟等报道显示黏液腺癌#65380;结肠型腺癌及印戒细胞癌的比例分别为61.9%#65380;28.6%及9.5%,而本组研究显示,结肠型腺癌所占比例最高,为66.67%,黏液腺癌及印戒细胞癌的比例分别为22.22%及11.11%,与上述研究略有差异#65377; MSI广泛存在于原核及真核生物的基因组中,具有较高的遗传稳定性