拟南芥类结瘤素基因At1g01070的表达模式和功能的初步研究.pdfVIP

PRELIMINARYRESEARCHONTHEEXPRESSION PATTERNANDFUNCTIONOFNODULIN．LIKE INAR GENE 070 ABIDOPSISTHALIANA AtlgOl ADissertationSubmitted ofHenanNormal totheGraduateSchool University inPartialFulfillmentofthe Requirements forthe ofMasterofScience Degree By Peng Fanglin Linsong Supervisor：Prof．Wang 2015 May 摘要 结瘤素基因(nodulin gene)是豆科植物与微生物共生固氮过程中宿主植物受诱导 而特异性表达的基因，不但在固氮过程中发挥着重要作用，而且参与植物体的信号转导， 物质运输以及渗透胁迫等多种生理过程。深入研究发现，非豆科植物中也存在一些与豆 科结瘤素基因同源的类结瘤素基因(nodulin．1ike gene)，越来越多的证据表明这些类结 瘤素基因也对非豆科植物的生命活动有着至关重要的作用。前期通过农杆菌转化法获得 南芥纯合植株，并以哥伦比亚野生型拟南芥做对照，初步探究了Atl901070的表达模式 及其功能。研究结果如下： 区共有957个核苷酸，编码氨基酸318个。使用MEGA5软件进行基因进化分析显示， 构域，三级结构均主要由a螺旋以及无规则卷曲缠绕折叠形成，符合跨膜蛋白特征，且 转运蛋白。 明，AtlgOl070基因在植株的根、茎、叶(茎生叶和莲座叶)、花以及荚果中均有表达， 并且主要位于各器官组织的维管束等纤维组织，提示AtlgOl070可能参与物质的运输过 程。利用激光共聚焦显微镜进行亚细胞定位，结果表明，AtlgOl070编码蛋白主要定位 在细胞的外围部位，质壁分离实验证明了其位于细胞膜结构上，与蛋白质结构预测结果 相符。 因相对表达量，超表达型与野生型拟南芥对比结果表明，超表达型拟南芥纯合株系中 芥株系中AtlgOl070．2表达水平较野生型拟南芥上调了4．20倍。 4、对超表达型拟南芥进行表型分析发现，在正常光照和温度条件下，超表达型拟 南芥的幼根均长于野生型拟南芥，说明拟南芥类结瘤素基因Atl901070具有促进植物根 部伸长的功能。营养生长时期，超表达型拟南芥植株叶片较大，长势明显优于野生型拟 南芥植株。生殖生长时期，超表达型拟南芥植株的茎秆伸长较快，株高较高，说明 9l和111株系抽苔以及开花时间晚于野生型拟南芥，但抽苔后生长较快，最终株高显著 高于野生型拟南芥。 本文明确了拟南芥类结瘤素基因AtlgOl070编码的产物为跨膜蛋白，通过在转基因 拟南芥中进行超表达试验，证明了该基因具有促进植物根部以及茎秆伸长的作用。结合 生物信息学分析推测，该基因编码蛋白可能是跨膜载体蛋白，具有转运生长素的功能， 为深入研究非豆科植物类结瘤素基因功能打下基础。 关键词：拟南芥，类结瘤素，AtlgOl070，组织定位，亚细胞定位，表型，功能 ABSTRACT of induced fixationmicrobesnodulationWCle Expressionplantgenes