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荧光定量PcR检测立克次体 Detection ofR耙后P船缸PReal—time PCRs by Quantitative 博士 后 张晶波 导 师 温博海研究员 研究专业 微生物学 流动站名称：军事医学科学院生物学博卜后流动站 单位名称：军事医学科学院微生物流行病研究所 研究工作起始时间：2003年11月 研究工作划满时间：2005年8月 军事医学科学院 北京 2005年8月 中文摘要 荧光定量PCR检测立克次体 博士后张晶波 导师温博海研究员 军事医学科学院微生物流行病研究所，北京100071 立变凌体楚一类霪要懿专性缨纛内枣生弱人蛰共纛痪爨髂，诲多立交次髂 感染也斌于薪茨和露发感染经疾瘸阻及今嚣有可稚赉黼的生物怒弼感染。建立 系列快速检测立竟次体瘸藤体方法辩予蠢效控制立克次体感染十分麓要。 实辩荧光定藿羚R较谈隽是嚣蓠梭测瘸器髂熬最抉速敬褰特舅器裹敏感戆 新技术，已开始用予病毒、缁菌等瘸原体豹浃遮稔测。我稍糇箨员氏柯克新体、 汉赛巴遐体、五霾热巴逶体、查蘸竣立兜体、曦霉噬缨赡无形体簿纛穗吏尧次 俸瓣将雾缝鏊蔽事戮设诗g|甥纛搽锌，建立了稔溺这些立壳次落瘸藤髂瓣耱特 辩性的实时荧光定耋阮R方法。与蒋邋PcR相魄较，这些实辩荧光定量PeR豹 姆舞蛙为l∞％，敏感性是整暹P嘿瓣l∞毽，霹检测少到lO个戳下麴秘浆基 因摇受。 采嗣实礴荧光定整PcR检测强氏柯觉颠绱实验感染Ba协，e小黼的样本，可 袭感梁意第一天斡蛊释零中梭溅撼瓣匏基因，撬示该袋巍定鬣PeR捻溺可爆予 疆氏褥巍新体感染的晕斓诊辑。丽建立的检测煲氏祷藏新俸瓣寰爵荧蠢定爨PeR 对贝氏糖支赣馋感染麴小瓯随黪艟簿赃嚣标本避行了检测，遂示脾脏立克次俸 豹感染爨与感染进程密切裰关。熏该荧光霆量麓R分凝炙氛姆竞鬻俸攻拳嚣懿 撬蘸免痰B矗LB庇小藏的膊脏稀本，结暴驻示惫痰小羲释脏中簸美菠柯竞新俸静 感染量照著甄予j#受瘦小鼠，二次加强免疫小鼠膊黢贝氏毒可克斯体的感染囊显 藩低予一次翔强凳痰豹夺飘。这终缭象说明该荧必定爨踅爱测定感凝小躐骆醚 贝氏瓤蠢颓休的载蘩可默凇礁分橱小鼠的感染程度稻评价候选奄熟疫萤瓣免疫 缳护效暴。 稀汉赛琵瀵俸褥羚装浆蹩定d爨PeR方法势辑汲赛罄遥侮感染转a新。，j、葭酶 脾脏等脏器标本，结果同样照示脾脏的汉赛巴通体载量与感染过程具有良好的 稻关牲。 用嗜蚕噬细腿无形体特男性荧光定量PeR检测菜栋医采爨瓣10铪蟀秘3e 份野鼠脾脏标本，检测的结果与特昴性套式PcR检测的结果基本一致，但荧光 定爨PcR敏感靛和可靠往显著高于套式PCR。 磅究涯明嚣哮建立的检测楗克矮传、巴遴髂嚣浚立竞体瓣实瓣荧党定量∞R， 具有高度的种特异性和高度敏感性，特别适合对皿标本以及组织标本中的微量 的立克诙体快速检测，可用予相应的立克次体感染的早期诊断。此矫，这臻荧 光定量pcR还≮曩予斓应立克次髂实验感染动魏熬感染程度分叛敷投超痰痰萤 免疫保护效果的实验室评价。 ABSTRACT DetectionofIUckettsiae Real—time PCRs by Quantitative Postdoctoralfcllow： JingboZhang