1第2章+生产菌种的来源.pptVIP

稀释倒平板法示意图 第二节　菌种的分离 一、常规法：平板稀释法和平板划线法 二、施加选择性压力分离法： 富集(enrichment)培养 是在目的微生物含量较少时，根据微生物的生理特点，设计一种选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，以利分离到所需的菌株。  利用特殊的分离培养对大量混杂微生物进行初步分离的方法。  分离培养基是根据目的微生物特殊的生理特性或利用固体平板或某些代谢产物生化反应来设计的。  可显著提高分离效率 三、随机分离方法： 有些微生物的产物对产生菌的筛选没有任何选择性好处，因此常随机地分离所需菌种，为此发展了一些快速筛选方法： 1、透明圈法  分离水解酶产生菌时较多采用，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、核酸酶等；  在平板培养基中加入溶解性较差的底物，使培养基混浊；  能分解底物的微生物便会在菌落周围产生透明圈，圈的大小初步反应菌株利用底物的能力。 例如用此法分离产生碱性蛋白酶的芽孢杆菌 2、变色圈法 对于一些不易产生透明圈产物的产生菌，可在底物平板中加入指示剂或显色剂，使目的微生物菌落周围呈现变色圈，从而能被快速鉴别出来； 如 筛选果胶酶产生菌：用含0.2%果胶为唯一碳源的培养基平板，对含微生物样品进行分离，待菌落长成后，加入0.2%刚果红溶液染色4h，具有分解果胶能力的菌落周围便会出现绛红色水解圈。 CMC作底物 刚果红指示剂 菌落周围呈黄色圈 又如 分离产纤维素酶微生物： 3、抑菌圈法--是常用的初筛方法  常用于抗生素产生菌的分离筛选 据估计，筛选1万个菌株才能得到1株有用的抗生素产生菌；因此，设计一个准确、快速的筛选模型十分重要。  工具菌采用抗生素的敏感菌 若被检菌能分泌某些抑制菌生长的物质，如抗生素等，便会在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈.