基础分子生物学Chapter24 RNA剪切与加工.pptVIP

Chapter 24;24.1 ?Introduction ?引言;在细胞核中,mRNA的加工包括3?和5?修饰以及内含子的去除等.剪接需要在内含子与外显子交界处产生断裂,然后将外显子末端连接.成熟的mRNA通过核孔被运到细胞质中去,在那里它完成翻译.;24.2 ?Nuclear splice junctions are short sequences. ?细胞核内的RNA剪接位点是各种短序列.;内含子的末端按GU-AG规则定义.;24.4 pre-mRNA splicing proceeds through a lariat. 前体mRNA剪接要通过套索结构.;5?和3?剪接位点以及分支位点对剪接过程而言是充分必要条件. 分支位点的序列在酵母中是完全保守的,但在较高等的真核生物中,其保守性则不是很高.;剪接反应分两个阶段,5?外显子首先被切开, 然后与另一个外显子的5?相连.;24.5 snRNAs are required for splicing. snRNA是剪接必需的.;24.6 U1 snRNP initiates splicing.?U1 snRNP启动剪接.;人类U1 snRNP有一个可产生数个结构域的配对结构, 其5?端保留着单链形式, 可以与5?剪接位点配对.;E复合物由三种物质连续地加入而成, 即U1-snRNP加到5?剪接位点, U2AF加到嘧啶区/3?剪接位点, 以及桥连蛋白SF1/BBP的加入.;24.7 The E complex can be formed by intron definition or exon definition. E复合物可通过内含子定界或外显子定界来形成.;多条途径可以启动对5?和3?剪接位点的识别.;24.8 ?5 snRNPs form the spliceosome. ?五种snRNP形成了剪接体.;剪接反应经过几个互相独立的阶段, 在此过程中, 能够识别共有序列的各组分之间的相互作用导致剪接体的形成.;24.10 Splicing is connected to export of mRNA. 剪接与mRNA出核相关联.;外显子连接复合体通过识别剪接复合体结合到RNA上.;REF蛋白结合剪接因子并保留在剪接产物上. REF结合到位于核孔的出核因子上.;24.11 Group II introns autosplice via lariat formation. ?II类内含子通过套索结构进行自我剪接.;三类剪接反应按两步酯交换作用进行: 首先游离羟基进攻外显子1和内含子结合处, 接着外显子1末端产生的羟基进攻外显子2与内含子结合处.;24.12 Alternative splicing involves differential use of splice junctions. 可变剪接使用不同的剪接位点.;两个位点参与的可变剪接可能导致外显子的增加或替代. ;24.13 trans-splicing reactions use small RNAs. ?反式剪接反应需要小RNA.;剪接通常发生在同一个RNA分子中, 但在另一种情况下, 由于不同RNA内含子之间配对, 能形成一种特殊的结构, 这时会发生反式剪接. ;锥虫SL RNA的一个外显子可以通过反式剪接与RNA的第一个外显子连接在一起. 这个反应与细胞核的顺式剪接反应具有同样的相互作用, 但是产生Y型而不是套索结构. ;24.14 Yeast tRNA splicing involves cutting and rejoining. 酵母tRNA剪接包括切割和重连两部分.;酵母苯丙氨酰-tRNA前体中的一个内含子可以和反密码子环配对, 从而改变反密码子臂的结构. 此tRNA前体内含子 “环” 与 “颈” 上一个受排挤碱基的配对可能是剪接所必须的. ;24.15 The splicing endonuclease recognizes tRNA. 剪接时核酸内切酶识别tRNA.;酿酒酵母tRNA前体的5和3的切割是由核酸内切酶的不同亚基催化的. 另一个亚基可能通过测量成熟tRNA结构中的某个点的距离, 以此为参数决定切割位点的位置. AI碱基对同样很重要. ;24.18 The 3′ends of polI and polIII transcripts are generated by termination. 终止反应产生聚合酶I和聚合酶III转录物的3端.;当终止产生3端, RNA聚合酶和RNA在DNA的终止子序列上被释放. ;当核酸内切酶在RNA的特定序列处切割并产生3端时, RNA聚合酶继续转录. ;24.19 The 3ends of mRNAs are generated by cleav