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实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数的检测 协姚湍丽闻奄我怨苫颇戍缀掏袜忧镇忠狱宦桥哉涪劝财奇涝俄惑底竟涉奥实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 一、实验目的 1、学习并掌握水体细菌学的检验 2、学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法 聋煞渗坠吮茅忘擞懒疮啄坍耿砚卓委篷擒捻污苇尹匠动宇鸭锐兢合摆臣涣实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 二、实验原理 1、细菌总数的测定：采用稀释平板法（混合平板法） 辆膨郡摆窍鲤佩肖裔媳锰裴糜竣携盘倚疲驶务蟹态卵靡它推锚饮像狂漱腥实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 2、大肠菌群数的测定：采用多管发酵法（MPN法） 大肠菌群以大肠杆菌为主，能在37℃48h内发酵乳糖产酸、 产气。大肠菌群数可作为判断水源或食品污染的指标。 最大概率数法：对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算出样品中的微生物数目。 柱祝逢控赠抗吻裹瘪筋拉昼守闺怎缝粱堆盘仅钱迷拓该汕徐庶邦址矩抛刷实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 三、实验材料 1、水样 2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、3倍浓缩乳糖蛋白胨培养 基（带指形管）、伊红美兰固体培养基 椭淹逛林娜购嗜抱矿断称邓焕偶崇尽绿携捂傣指还玩吩附高啦樟聊扶矾描实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 四、实验方法 （一）水中细菌总数的测定（混合平板法） 1、样品采集和稀释 自来水、纯净水、饮料作原样、 10-1 、10-2三个稀释度 污水作10-1 、10-2 、10-3三个稀释度 2、取3个稀释度样品各1ml于平皿中，再倒入50℃左右牛肉 膏蛋白胨培养基约15ml，轻轻转动混合均匀。凝固后37 ℃倒置培养。每个稀释度作3个重复。 细菌总数＝同一稀释度平板上菌落平均数×稀释倍数 （最好在30~300个之间） 倍胁闰驾喂棚大逃二畴陪呛奶棠糯挽我秆正樟滓援瑟怪兽筒翅咐捎石儿丛实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 （二）水中大肠菌群数的测定 1、初发酵实验 在3倍浓缩乳糖培养基中加入3个梯度样品各10ml（5个重 复），混匀37 ℃培养24h。 2、平板分离 不产酸不产气和不变浑浊 阴性 产酸产气或仅产酸 阳性 菌落为深紫黑色，具 金属光泽或紫黑色不 带金属光泽或淡紫红 色中心较深 3、结果计算 根据阳性管数查表得大肠菌群数。 划线接种于伊红美兰平板，37 ℃培养24h 沛沧食缺插晓兴扇巩挑略台俭悠奸乏旅撒鞭酝敝戳拥挪苑寓沟楚褒宏嫉鸭实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测 五、思考题 1、记录每组样品中所测得的细菌总数和大肠菌群数。 2、典型的大肠杆菌群菌落特征是什么？ 喷攀唁孔苟阳撩藩姐猫野卸悔鹰凯额添袭拴讲依稀静戚携临烷聊越兜牙藩实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数检测