流式细胞仪在生物学中的应用.PDFVIP

第 22 卷第 4 期 生 物 学 杂 志 Vol. 22 　No. 4 2005 年 8 月 　 JOURNAL OF BIOLOGY 　 Aug ,2005 流式细胞仪在生物学中的应用 耿慧霞 ,王　来 ,王　强 (河南大学生命科学学院 ,河南开封 475001) ( ) 摘　要 :简要论述了流式细胞仪 flow cytometry ,FCM 的工作原理 ,并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述 ,包括 对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研究应用。 关键词 :流式细胞仪 ;细胞凋亡 ;细胞周期 ( ) 中图分类号:Q331. Q2 文献标识码 :B 文章编号 :1008 - 9632 2005 04 - 0044 - 02 ( ) 　　流式细胞仪 flow cytometry , FCM 研制、发展、革新 光。 和应用领域的扩展 ,都是由生物学、生物技术、计算机 1. 2 　流式细胞仪的工作原理 科学、电子工程学、流体力学、激光技术、分子生物学、 经荧光染料标记过的细胞样品制成单细胞悬液 , 有机化学和物理学等多个学科综合发展和应用而实现 以一定的流速经过喷嘴,流速的选择与检测的目的有 的。近代流式细胞仪 , 由于单克隆抗体技术、定量细胞 关 ,此液流刚好经过光源发出的激光形成的聚焦区 ,此 化学和定量荧光细胞化学的应用 ,使其在生物学、临床 时 ,标记的荧光染料在激发光的激发下发射出特异颜 医学等众多研究领域的应用愈来愈广泛和重要 ,尤其 色的荧光信号和散射光信号 ,信号的强弱与细胞内待 在生物学中对细胞周期的动力学分析、细胞因子、细胞 测组分的含量呈正比。荧光信号和散射光信号经过光 凋亡、信号传导、RNA/ DNA 的分析、细胞表面受体及特 电倍增管和光电探测器接收后转换成电脉冲,送入计 异性抗原的分析等领域发挥着独特作用 ,具有操作简 算机处理 ,应用不同的分析软件可分析样品的各种参 单、分析精确、重复性好、费用低廉、分析速度快等优 数 ,最后以直方图或三维图的形式显示出来。此外 ,还 点。 可以用不同的标记物进行双参数、三参数、甚至多参数 1 　流式细胞仪的基本知识 的分析。另外 ,运用流式细胞仪根据细胞的形态或标 1. 1 　流式细胞仪的基本参数 记染料的荧光信号对细胞进行分选 , 以便进一步培养 ( ) 1. 1. 1 　前向角散射 forward scatter , FSC 　前向角散射 研究。 和细胞的直径密切相关 ,可用来检测细胞的大小 ,通常 2 　流式细胞仪在生物学中的应用 在应用中 ,可将其设为阈值来排除样品中的各种碎片 流式细胞仪在医学临床方面应用的较为广泛 , 如 及鞘液中的小颗粒物质对被测细胞的干扰。 肿