PP1α对骨肉瘤Wnt%2fβ-catenin信号通路途径影响.pdfVIP

安徽医科大学硕士学位论文 PP1α对骨肉瘤Wnt/β-catenin 信号通路途径的影响 中文摘要 目的 探索PP1α对骨肉瘤Wnt/β-catenin 信号通路途径的影响，为进一步研究 PP1α在骨肉瘤发生、发展、凋亡过程发挥的作用提供基础。 方法 提取骨肉瘤U-2OS 细胞总RNA, RT-PCR 扩增PP1α并克隆至pEGFP-N1 真 核表达载体，将重组质粒阳性克隆转染U-2OS 细胞经过培养24 到48 小时后以 Western blot 检测其PP1α的蛋白水平表达。通过RT-PCR 比较野生型和高表达 PP1α细胞株Wnt/β-catenin 信号通路中相关分子β-catenin、c-myc、cyclinD1 的表 达差异，观察PP1α对该信号通路的影响。 结果 成功构建真核表达载体pEGFP-N1-PP1α，转染U-2OS 细胞后PP1α 蛋白表 达水平增强并且 PP1α 高表达细胞株 β-catenin 信号通路中 β-catenin 、c-myc 、 cyclinD1 mRNA 表达水平呈时间依赖性增强。 结论 PP1α表