软骨发育不良一家系的FGFR3基因突变分析.pdfVIP

· 1982 · 广东医学 2012年7月第 33卷第 13期 GuangdongMedicalJournalJu1．2012，Vo1．33，No．13 软骨发育不 良一家系的FGFR3基因突变分析术 姜海鸥 ，黄雪霜 ，全庆丽 ，张康 四川大学华西临床医学院分子医学研究中心 (成都 610041)；怀化医学高等专科学校医学遗传学教研室(湖南 怀化 418000) 【摘要】 目的 探讨一个中国汉族软骨发育不良家系的临床表型及 FGFR3基 因突变类型，确定其致病原 因。方法 在获得知情同意后对该家系成员进行病史采集和临床检测，并对其中3例患者和3例正常亲属及家系 外100例正常对照者采血进行DNA提取，采用聚合酶链反应结合DNA直接测序法对 FGFR3基因的第 10、13外显 子及其部分内含子进行突变检测。结果 该家系中3例患者的临床表现为身材矮小、四肢过短、腰椎前突、头颅 增大、前额突出。3例患者在 FGFR3基因对应 cDNA序列发现C1620A(N540K)杂合突变及第 13内含子3剪接位 点上游23bp处发现一GA杂合突变，3例正常亲属及家系外 100例正常对照者均未发现该两种突变。结论 FGFR3基因的N540K突变是导致该家系软骨发育不 良的关键性分子病因，而内含子 IVS13—23突变可能加重 了 患者的病情。 【关键词】 软骨发育不良；成纤维细胞生长因子受体3；N540K；IVS13—23突变 与成纤维细胞生长因子受体 3(fibroblastgrowth factorreceptor3，FGFR3)基因有关 的遗传性侏儒主要 有软骨发育不 良(hypochondroplasia，HCH)、软骨发育 不全 (achondroplasia，ACH)。HCH和 ACH在家系中呈 Ⅱ 常染色体显性遗传模式，均以身材矮小为特征 ，表现为 四肢过短 、椎骨茎缩短。虽然 ，常见 的HCH症状较 ACH轻 ，但两者仅存在细微 的表型差别 ，单从I临床 表型和x线表现上，两者不易区分。有研究 报道， Ⅲ 98％的ACH患者 由FGFR3基因的G380R突变引起， 而60％～65％的HCH患者被检测到 FGFR3基因的 箭头所示为先证者 图 1 HCH家系 N540K突变。为明了该家系患者的软骨发育异常类型 及分子致病机制，2010年5月至2011年 12月我们对 1．2 方 法 HCH一家系进行了临床表型及FGFR3突变分析。 1．2．1 基因组 DNA提取 征得先证者及亲属同意， 1 资料与方法 由专科医生对患者进行体格检查及影像学检查 ，确诊 后 ，将家系中3例患者 (1I2、llI2、Ill3)及3例正常亲属 1．1 一般资料 一个湖南邵阳汉族HCH家系见图1。 (II1、Ⅱ3、Ⅲ1)作为研究对象，另外选取 100例家系外 先证者 (II2)女，43岁，身高 130am。头颅增大，前额 正常人作为对照，取肘静脉血 5mL，肝素钠抗凝，用 突出，嘴唇肥厚 向外突；胸椎后突，腰椎前突，臀部后 DNA提取试剂盒提取基因组DNA，分装后保存备用。 翘，关节处膨大，双足并拢时双漆间距较宽；躯干高度 1．2．2 PCR扩增 扩增区域覆盖 FGFR3基因第 10、 正常，四肢粗短，特别是双下肢短。四肢肌力和智力正 13外显子及其外显子与内含子的交界序列，引物序列 常，能胜任 日常工作。先证者家系3代共 12人 ，其中 分另为：FGFR3El0正向5一AGGAGcTcGTGGAGGCT— 患者4例，所有患者智力正常。先证者已婚育，其女儿 GA一3 ，FGFR3E10反 向5 一GGAGATCITGTGCACG—