过表达连接蛋白32对人肝癌细胞株MHCC-97H体外侵袭能力的影响.pdfVIP

第 39卷第 4期第 439页 华 中科技大学学报 (医学版 ) Vo1．39 No．4 P．439 2010年 8月 ActaM edUnivSciTechnolHuazhong Aug． 2010 过表达连接蛋 白32对人肝癌细胞株 MHCC一97H 体外侵袭能力的影响 朱 倩 。， 夏羽佳 ， 涂 炜 ， 罗 敏 ， 周珍珍 ， 晏 维 ， 林海华 ， 邓 欢 ， 田德安 华 中科技大学 同济医学院附属同济医院消化 内科 ，武汉 430030 深圳市观澜人 民医院 ，深圳 518110 摘要 ：目的 探讨过表达连接蛋 白32(Cx32)对人肝癌细胞株 MHCC97H体外侵袭能力的影响。方法 应用 Lipo— fectamine2000将 pcDNA3．1(一)／Cx32重组质粒转染至 MHCC～97H细胞 ，G418稳定筛选。采用 Westernblot法检测 Cx32蛋 白表达，划痕标记荧光传输实验显示细胞通讯功能的变化，Transwell实验检测细胞侵袭能力的改变。结果 转 染 pcDNA3．1(一)／Cx32重组质粒使得 MHCC一97H细胞过表达 Cx32蛋 白。与正常对照组和转染空质粒组细胞相 比， 转染 pcDNA 3．1(一)／Cx32重组质粒并过表达 Cx32的细胞胞问通讯功能增强 ，细胞侵袭能力减弱。结论 Cx32在人 原发性肝癌 的侵袭过程 中可能起抑制作用。 关键词 ：连接 蛋白32； 肝细胞癌 ； 细胞侵袭 中图分类号 ：R735．7 DOI：10．3870／．issn2Ol0．04．003 EffectofConnexin32oVerexpressiOnonInvasionofHumanHepatOcellular CarcinomaCelILineM HCC一97H invitro ZhuQtan～，XiaYujia，TuWetetal DepartmentofG＆sfr0Pfrozog-y，TongjiHospital，TonjiMedicalCollege，HuazhongUniversityof Scienceand Technology，W uhan430030，China ShenzhenGuanlanPeople’ Hospital，Shenzhen5181j0，China Abstract Objective ToinvestigatetheeffectofConnexin32(Cx32)ontheinvasionofhumanhepatocellularcarcinomacellline MHCC一97H．Methods ThepcDNA 3．1(一)／Cx32plasmidwastransfectedintoMHCC一97H cells．CellswithCx32overexpres sionwerescreened withG418and validatedbyWestern blotanalysis．Thegapjunction intercellularcommunication between cellswasdetectedbyscrape-loadinganddyetransferassay．TheinvasionofcellswasdetectedbyTranswellassay．Results Fhe cellstransfeetedwithpcDNA 3．1(一)／Cx32plasmidoverexpressedCx32．AScomparedwithblankcontrolsandcellstransfect edwithvector，thegapjunctionintercellularcommunicationofcellswithCx320verexpressi0nwasenhanced，whilethe