钠离子调节成骨细胞功能及其相关基因的差异性变化.pdfVIP

广东医学 2012年2月 第33卷第3期 GuangdongMedicalJourn~ Feb．2012，Vo1．33，No．3 · 299 · 钠离子调节成骨细胞功能及其相关基因的 差异性变化 ：l： 卢丽 ，林晓慧 ，陈琚 ，陆幸妍 ，吴亮 ，贾欢欢 ，万超 ，李青南 。广东药学院生命科学与生物制药学院新药功能研究中心(广州510006)；香港中文大学医学院生物医学学院 干细胞与再生医学中心 【摘要】 目的 探讨钠离子(Na)对大鼠成骨细胞成骨功能的调节，及其相关基因mRNA的变化。方法 应用CCK一8试剂盒和碱性磷酸酶(AKP)试剂盒检测5种不同浓度Na 对成骨细胞增殖和分化的影响。再从中 选用低(1×10 mol／L)、中(O．1mol／L)、高(0．5mol／L)3种浓度，于处理细胞 15、30、120min时，通过 RT—PCR 测定Na 对成骨细胞成骨功能相关基因OPN、CbfalmRNA转录的影响。结果 在 1×10～～1molfL范围内。与 正常组相比，低浓度 Na 明显促进成骨细胞分化，使AKP活性增加，高浓度则呈抑制作用，而Na对成骨细胞的正 常增殖无影响。RT—PCR结果显示与正常组相比，低浓度Na显著地上调成骨细胞OPN、CbfalmRNA的转录，高 浓度则呈抑制作用。然而OPN、Cbfal基因对 Na调节作出反应所需的时间存在差异，Cbfal基因在经处理30min 时即可出现mRNA转录变化，而OPN基因则在处理 120min时才出现相应改变。结论 Na可直接调节成骨细胞 成骨功能，低浓度促进成骨细胞分化和相关功能基因OPN、Cbfal的增加，而高浓度则显示抑制作用；且各基 因转 录变化具有时间差异 。 【关键词】 钠离子；成骨细胞；碱性磷酸酶；OPN；Cbfal Regulationofsodium onosteoblastandosteogenesisgenes． LULi LINXiao—hui，CHENJun，LU 一yan， WULiang，JIAHuan—huan，WANChao，LI 一nan． SchoolofLifeScienceandBiopharmacy，GuangdongPharma— ceuticalUniversity，Guangzhou510006，China Correspondingauthor：LIQing—nan．Tel：0086—20E—mail：qingnanli@sina．com 【Abstract】 Objective Tostudytheregulativeeffectsofsodiumontheratosteoblastandtheosteogenesisgene transcription．Methods Osteoblastswereisolatedfrom neonatalSDratskul1．Cellproliferationanddifferentiationweree— valuatedbyCCK一8assaykitandAKPassaykit，respectively．Thetranscriptionofcbfal(Core—bindingfactora1)，OPN (Osteopontin)wereassessedbyRT—PCR15，30，120minaftertreatedbydifferentconcentratesodiummedium (1× 10～moVL，0．1mol／Land0．5mol／L)．Results Lowconcentrationsodium (1×10 mol／L)significnatlypromoted theosteoblastalkalinephosphatase(AKP)activity，andosteogenesisgenes(OPNandCbfa1)transcriptionat2h．How- ever，singificantoppositeeffectswererevealedinhighconcentrationsodium (0．5mol／L)onosteoblast．Observedre- sponseofCbfalmRNAwasrevealed30minaftertreatment，whileOPNwasdelayeduntil120minaftertreatment．Con— clusion Sodium Cna regulateboneformationinosteoblast，low sodium concentrationp