二苯乙烯苷含药血清作用于老年性痴呆细胞模型的最佳条件筛选.docVIP

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二苯乙烯苷含药血清作用于老年性痴呆细胞模型的最佳条件筛选.doc

  二苯乙烯苷含药血清作用于老年性痴呆细胞模型的最佳条件筛选 :黄忠仕,张树球,农嵩,李韬,李曙波 【摘要】   目的 确定二苯乙烯苷含药血清作用于老年性痴呆(AD)细胞模型的最佳条件。方法 利用细胞计数、MTT方法确立β淀粉样蛋白(Aβ)25-35片段在建立AD细胞模型时的浓度及筛选二苯乙烯苷含药血清作用的最佳浓度,分别观察不同浓度血清及不同浓度Aβ25-35对AD细胞模型存活率的影响。结果 各种血清以5%浓度组的细胞存活率最高。在5%血清浓度下,Aβ25-35 0μmol/L和5μmol/L浓度组中各含药血清组细胞存活率均明显高于正常大鼠血清组(Plt;0.05或Plt;0.01),但在10μmol/L Aβ25-35浓度时差异无显著性。结论 选用5μmol/L Aβ25-35及5%血清浓度建立NG108-15 AD细胞模型及药效考察体系较为合适,在此条件下能客观地评价二苯乙烯苷含药血清的药效。 【关键词】 二苯乙烯苷 痴呆 老年性 β淀粉样蛋白 NG108-15细胞 Abstract: Objective To confirm the optimum conditions of TSG-containing serum affect on cell model of Alzheimers disease (AD). Methods Cell counting and MTT technique ine the optimum concentration of amyloid β25-35(Aβ25-35) and drug-containing serum in establishing cell model of AD, then observed the cell survival rate of the cell model after treated and of amyloid β25-35, respectively. Results 5% concentration of serum resulted in the highest cell survival rate among all kinds of serum. At the 5% concentration of serum condition, the cell survival rate of drug-containing serum groups al serum group at 0μmol/L and 5μmol/L concentration of Aβ25-35 (Plt;0.05 or Plt;0.01), but had no difference at 10μoml/L concentration. Conclusions It is the optimum condition to select 5μmol/L concentration of Aβ25-35 and 5% concentration of drug-containing serum to establish the NG108-15 cell model of AD and the best system to assess the drug efficacy. Under these conditions can be objectively assessed the drug efficacy of TSG-containing serum.   Key entia, senile; amyloid beta-protein; NG108-15 cells      用动物模型研究老年性痴呆(AD)能够反映整体水平的变化以及行为和记忆功能的改变,但由于体内复杂因素的影响,对某些特殊类型细胞功能及细胞结构、酶、离子及其通道、受体的研究却较困难。动物细胞的体外培养成功弥补了这一缺陷。利用细胞培养法建立AD细胞模型已经成为 现代 生物医学研究AD的重要手段[1,2]。我们将β淀粉样蛋白(Aβ)25-35作用于NG108-15神经细胞,建立AD细胞模型,研究二苯乙烯苷(2, 3, 5, 4′-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glycoside, TSG)含药血清对AD细胞模型的影响。本实验主要探讨建立AD细胞模型的Aβ25-35的最佳浓度和二苯乙烯苷含药血清的最佳作用浓度,观察在不同浓度Aβ25-35和不同浓度二苯乙烯苷含药血清的细胞存活率。现报道如下:    1 材料   1.1 动物   健康3月龄P),青霉素(Penicillin) G,硫酸链霉素,MTT(以上试剂由Sigma公司提供);HAT(次黄嘌呤/胸

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