基于基因组dna诱变的遗传重组改造乙醇工业酵母的耐热性及发酵性能.pdfVIP

生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2011, July 25; 27(7): 1049−1056 journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061 cjb@im.ac.cn ©2011 CJB, All rights reserved. 生理工程 基于基因组DNA 诱变的遗传重组改造乙醇工业酵母的 耐热性及发酵性能 1,2 1 1 1 刘秀颖 ，何秀萍 ，卢莹 ，张博润 1 中国科学院微生物研究所 酵母菌分子遗传与育种实验室，北京 100101 2 中国科学院研究生院，北京 100049 摘 要: 酵母菌是乙醇发酵工业中非常重要的微生物细胞工厂，发酵过程中温度变化胁迫一直是影响生产效率的重要 瓶颈之一，选育具有广泛温度适应性的酵母菌株对提高发酵性能和降低生产成本具有重要意义。通过化学诱变和基于 基因组DNA 诱变的遗传重组技术对乙醇工业酵母菌的温度适应性进行改造，获得耐热性能和发酵性能得到提高的重组 酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae T44-2 。重组菌株T44-2 的最高生长温度比原始菌株CE6 提高了 3 ℃，48 ℃和52 ℃ 热激处理 1 h，重组菌株的细胞存活率分别是原始菌株的1.84 和 1.87 倍。重组菌株在30 ℃~40 ℃范围内具有良好的糖 醇转化率和乙醇产量，发酵200 g/L 葡萄糖能够产生83.8~91.2 g/L 乙醇。重组菌株在43 ℃和44 ℃发酵时乙醇产量仍 分别有69.2 g/L 和52.6 g/L ，而此时原始菌株基本没有活性。研究结果为酿酒酵母在乙醇高温发酵中的应用奠定了基础， 可极大降低冷却成本。 关键词: 乙醇工业酵母，遗传重组，温度适应性，耐热性 Improvement of thermal adaptability and fermentation of industrial ethanologenic yeast by genomic DNA mutagenesis-based genetic recombination 1,2 1 1 1 Xiuying Liu , Xiuping He , Ying Lu , and Borun Zhang 1 Laboratory of Yeast Molecular Genetics and Breeding , Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China Abstract: Ethanol is an attractive alternative to fossil fuels. Saccharomyces cerevisiae is the most important ethanol producer. However, in the process of industrial production of ethanol, both cell growth and fermentation of ethanologenic S. cerevisiae are dramatically affected by environmental stresses, such as thermal stress. In this study, we improved both the thermotolerance and fermentation perf