染料木黄酮对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用.doc

　　染料木黄酮对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用 ：杨延东 高全桂 陈文芳 【摘要】 　　目的 探讨染料木黄酮对1甲基4苯基1,2,3,6四氢吡啶（MPTP）制备的帕金森病（PD）模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法 将C57BL6雄性小鼠随机分为正常对照组、MPTP模型组及染料木黄酮预处理组。用逆转录聚合酶链式反应（RTPCR）技术检测黑质酪氨酸羟化酶（TH）及多巴胺转运体(DAT) 基因的表达水平。应用高效液相色谱法检测纹状体（Str）内DA及其代谢物二羟基苯乙酸（DOPAC）含量。结果 MPTP模型组黑质TH和DAT基因的表达较正常对照组明显降低，染料木黄酮预处理组可逆转上述改变（F=20.31、13.19,Plt;0.01)。MPTP模型组Str内DA及其代谢产物DOPAC的含量较对照组明显减少，应用染料木黄酮后可逆转上述改变(F=63.58、16.12,Plt;0.01)。结论 染料木黄酮对MPTP制备的PD模型小鼠黑质纹状体DA能神经元有明显的保护作用。 【关键词】 帕金森病 染料木黄酮 1 甲基 4 苯基 1 2 3 6 四氢吡啶 黑质 纹状体 　　［ABSTRACT］ Objective To investigate the protective effect of genistein on doparminergic neurons. Methods C57BL6 mice ly divided into three groups: control group (DMSO, ip), MPTP group (15 mg/kg, ip) and genisteinpretreatment (10 mg/kg, ip) group. The changes of tyrosine hydroxylase (TH) and dopamine transport (DAT) gene expression in substantia nigra (SN) erase chain reaction (RTPCR). The contents of DA and its metabolites dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) ined by high performance liquid chromatographyelectrical chemical detection (HPLCECD). Results Genistein pretreatment could prevent the MPTPinduced decrease of TH and DAT gene expression (F=20.31,13.19;Plt;0.01). MPTP significantly decreased the levels of dopamine (DA) and its metabolites dihydroxyphenylacetic acid (DOPAC) in the striatum, ent (F=63.58,16.12;Plt;0.01).Conclusion Genistein has neuroprotective effects on dopaminergic neurons against MPTPinduced mouse model of PD. 　　［KEY PTP）建立PD模型小鼠，研究染料木黄酮对黑质酪氨酸羟化酶（TH）和多巴胺转运体(DAT)基因表达以及纹状体DA及其代谢产物含量的影响，以期为PD的防治提供进一步的实验依据。现将结果报告如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物和药品 　　选用健康雄性C57BL6小鼠18只，体质量为(20±2)g,由北京维通利华动物实验中心提供，合格证号：SCXK（京）20020003。置于（19.0±2.0）℃室温下，以12 h12 h昼夜循环光照，自由进食、饮水。动物于实验前适应实验室环境1周。染料木黄酮为上海同田生化技术有限公司产品；MPTP、DA和DOPAC均为Sigma公司产品；逆转录试剂盒为PROMEGA公司产品；Tag DNA聚合酶为TAKARA公司产品。 　　1.2 实验动物造模与给药 　　实验动物随机分为正常对照组、MPTP模型组和染料木黄酮预处理组，每组6只。3组动物每天8：00时先行腹腔注射二甲基亚砜（DMSO)或染料木黄酮(10 mg/kg)，连续3 d；MPTP模型组于第4天注射DMSO后2 h开始腹腔注射MPTP(15 mg/kg)，连续注射4次，每次间隔2 h，自第5天开始继续腹腔注射DMSO，连续4 d；染