灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的抑制作用.doc

　　灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的抑制作用 ：王筱婧，徐江平，程玉芳 【关键词】 灵芝 　　摘要 :目的 研究灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的影响，并初步探讨其抑瘤机制。 方法 建立裸鼠移植性人肝肿瘤模型，采用随机区组设计法随机分为空白对照组、阳性对照组及灵芝孢子粉组，观察裸鼠肿瘤生长。采用苏木精-伊红染色法、SP免疫组织化学法及病理Imagepro Plus5.0彩色图像定量分析法检测裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）。 结果 灵芝孢子粉为2.1g.kg时，对裸鼠移植瘤的抑制率为57.0%，与空白对照组比较有显著差异（Plt;0.01）。镜下观察，灵芝孢子粉组与空白对照组相比，肿瘤坏死组织较多，细胞异型性较小。灵芝孢子粉组VEGF、MVD表达水平较空白对照组有明显下降。 结论 高浓度及大剂量的灵芝孢子粉对肝肿瘤有明显抑制作用，并能抑制肿瘤新生血管生成，其机制可能与对VEGF表达的抑制有关。 　　关键词 :灵芝孢子粉;HepG 2 ;裸鼠;血管生成 　　Abstract:Objective To evaluate the inhibitory effect and antiangiogeic effect of Lucid Ganoderma spore（LGS）on the groan hepatocarcinoma HepG 2 xenograft in athymic nude mice.Methods The nude mice models of human hepa-tocarcinoma HepG 2 ly divided into a NS blank control group，a5-FU positive treatment control group and a LGS treatment group.H-E staining，SP immunohistochemistry and quantitative pathologic image analysis system icrovessel density（MVD）and expression of vascular endothelial groor ti-ssue.Results The in vivo study revealed that LGS produced quite certain therapeutic effect on the groa cell strain（dose:2g.kg，inhibitory rate:57.0%，Plt;0.01）.Morphologic study shoore necrosis and less degree of atypia，decreased MVD and VEGF expression in the LGS group，as pared or tissue of human hepatocarcinoma HepG 2 in nude mice.Its mechanisms may be related to the reduction of VEGF expression. 　　Key a spore;hepatocarcinoma cell strain HepG 2 ;nude mouse;angiogenesis 　　大量的实验研究表明，肿瘤新生血管的形成与肿瘤的生长和转移扩散密切相关［1］ ，肿瘤的血管密度与实体瘤的预后有关。抑制新生血管的形成，则能抑制肿瘤的生长和转移，使肿瘤处于休眠状态［2］ 。灵芝是担子菌纲多孔科灵芝属真菌，其生长成熟后所散发出来的孢子体即灵芝孢子粉。灵芝孢子粉富含三萜、多糖及微量元素等有效成分。临床报道孢子粉可改善机体的免疫功能，防治癌症，减轻患者对放疗、化疗的不良反应［3～5］ 。近来有报道显示，灵芝提取物对前列腺癌细胞的血管内皮生长因子（VEGF）和肿瘤生长因子β 1 （TGF-β1 ）有抑制作用［6］ 。为了进一步证实其客观疗效并研究其作用机制，本实验选用裸小鼠人肝癌HepG 2 移植瘤模型，观察该药对肿瘤的抑制作用，进一步检测肿瘤组织中VEGF及微血管密度（MVD），研究灵芝孢子粉对肿瘤血管生成的影响。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 肿瘤细胞株 HepG 2 为人肝癌细胞株，由南方医院肿瘤科生物治疗室提供，用DMEM培养基（含10%小牛血清，青霉素10 5 U.L，链霉素100mg.L），37℃，5%CO 2 培养。 　　1.1.2 实验动物 6～9周龄BALB.C裸鼠30只，体重22～30g，雌雄不拘，无特定病原体（SPF