Hsa-miR-660负调控人类肝脏组织中药物代谢酶CYP3A4的表达.pdfVIP

里 搪 医学版 复 亏 Fudan UnivJ Med SSci2二u()1J3sL]。p．‘，’4叶。¨、(5) 505 an Univ M ed Hsa—miR-660负调控人类肝脏组织中 药物代谢酶CYP3A4的表达 张艺婷 王晓飞 魏之昀 陈铭杰 邢清和地 (’复旦大学生物 医学研究院发育生物学与 出生缺 陷研究所 上海 200032 。郑州大学基础医学院药理学教研室 郑州 450001；上海交通大学 Bio—x研究所 上海 200030) 【摘要】 目的 探讨 Hsa-miR-660(简称 miRNA-660)是否参与调控人类重要 I相药物代谢酶CYP3A4的表达，是 否影响人类肝脏组织 中的 CYP3A4酶活性 。方法 生物信息学预测 出miRNA-660可 以作用于 CYP3A4基因 mRNA3端非编码 区(3untranslatedregion，3UTR)；细胞转染和双萤光素酶报告实验进一步验证miRNA-660能直 接作用于 CYP3A4mRNA3UTR；收集 28例人肝脏组织，检测其成熟 miRNA-660表达量、CYP3A4的mRNA和蛋 白质表达量及酶活性 ；将 miRNA-660表达水平与 CYP3A43种表达水平进行 Pearson两两 回归分析 ，探索 miRNA- 660与CyP3A4表达之间的相关性，从而推测miRNA-660在调控 CYP3A4表达中的作用。结果 miRNA-660能 直接作用CYP3A4mRNA3UTR(t检验，P=0．017)，miRNA-660表达量与CYP3A4mRNA表达量无显著相关性 (P=0．20)，但与 CYP3A4蛋白表达量、酶活性负相关 (PO．05)。结论 在肝脏组织 中，miRNA-660虽然不影响 CYP3A4基因的mRNA表达，但可能在翻译水平抑制其蛋 白质表达及酶活性，负调控 CYP3A4基因的翻译过程。 miRNA-660可能直接参与调控人肝脏组织 中CyP3A4的表达 ，miRNA可能是引起人群 中CYP3A4酶活多态性的 重要原因之一 。 【关键词】 肝脏组织； miRNA-660； cyP3A4； 相关性 【中图分类号】 Q756 【文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1672—8467．2013．05．001 Theexpression ofdrugmetabolism enzymeCYP3A4inhuman liversisdown。。regulatedbyHsa’’miRl-660 ZHANGYi—ting ，WANG Xiao—fei，WEIZhi—yun。，CHENMing—jie，XINGQing—he△ (InstituteofDevelopmentalBiologyandBirthDefects，InstitutesofBiomedicalScience，FudanUniversity，Shanghai 200032，China； DepartmentofPharmacology，SchoolofPreclinicalMedical，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450001， HenanProvince，China；Bio-X Institutes，ShanghaiJiaotongUniversity，Shanghai200030，China) [Abstract] Objective Toknow whetherHsa-miR一660 (miRNA一660)isinvolvedinregulatingthe expression ofthe most important human phase I drug metabolism enzyme CyP3A4。especially influencingtheC P3A4enzymeactivity inhuman livers． M ethods Bioinformaticsmethodwasused andpre