hTERT、Skp2、TTF-1mRNA联合检测在非小细胞型肺癌早期诊断中的意义.pdfVIP

广东医学 2015年5月第 36卷第 1O期 GuangdongMedicalJournal May．2015，Vo1．36，No．i0 · 1523 · hTERT、Skp2、TTF一1mRNA联合检测在非小细胞型 肺癌早期诊断中的意义水 丁明 ，仇铁峰 ，李献文。，金建华。，王科平 江苏大学附属医院呼吸科 (江苏镇江 212001)；江苏大学附属武进人 民医院 呼吸内科，’肿瘤内科 (江苏常州 213000)；江苏省南京市胸科医院胸外科 (210029) 【摘要】 目的 探讨联合检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)、S期激酶相关蛋白2(skp2)、甲状腺特异性增强 子结合蛋白(n1F一1)基因在肺癌患者外周血中微转移中的临床意义。方法 选取60例经病理组织学确诊为非 小细胞型肺癌 (NSCLC)的患者、同期诊断为肺部 良性疾病的20例患者为研究对象，未进行任何治疗前收集各研 究对象的外周血 ，实时荧光定量 PCR方法检测血 hTERT、Skp2、1TrF一1mRNA并进行评价分析。结果 (1) NSCLC患者外周血中hTERT、Skp2、TYF一1mRNA高表达；(2)NSCLC患者外周血中hTERT、Skp2、rrI、F一1mRNA 的表达均与患者肿瘤的TNM分期显著相关(P0．05)，与年龄、性别、吸烟、肿瘤的组织学类型及分化程度无明显 相关性(P0．05)；(3)外周血hTERT、Skp2和 rITrFmRNA 的检测对于早期诊断NSCLC具有较高的特异性和较好 的敏感性，三种基因联合检测可以提高诊断的敏感性 (80％)。结论 联合检测外周血 hTERT、Sk．p2和 1TrFmRNA 可显著提高诊断的敏感性 ，具有早期诊断NSCLC的潜在价值。 【关键词】 人端粒酶逆转录酶；S期激酶相关蛋 白一2；非小细胞型肺癌 2025年我国肺癌年死亡人数可达 100万，空气污 疗前抽取外周血检测。选取同期诊断为肺部 良性病变 染 ，特别是 PM2．5含量持续维持高位是肺癌的发病率 患者20例为对照组，其中男9例，女 11例，年龄35～ 和病死率明显上升的罪魁祸首 。但肺癌早期发现率 75岁 ，中位年龄52岁 ，该组患者均排除其他部位恶性 低也是肺癌高死亡率的重要原因之一 ，约70％ ～80％ 肿瘤 。 的患者确诊时已处于中晚期，而且 30％一40％接受根 1．2 RT—PCR检测外周血靶基 因 所有研究对象空 治性手术治疗的 I期非小细胞型肺癌 (NSCLC)患者最 腹抽取外周静脉血4mL，EDTA—Na抗凝 ，并分离淋巴 终复发并死于复发 。因此，肺癌的早期诊断、早期 细胞 ，提取总 RNA。获得合格样本 ，逆转录合成 cD— 治疗成为改善肺癌的预后和提高生存率的重要措施。 NA。设计引物序列如下：B—actin正义 (5 一CAC． 循环肿瘤细胞(circulatingtumorcells，CTCs)为脱离实 GAAACTACCTTCAACTCC一3)， —actin反义 (5 一 体瘤原发灶或转移灶进入外周血循环 的一类肿瘤细 CATACTCCTGCTTGCTGATC一3)；Skp2正 义 (5 一 胞 ，在外周血中的数量稀少 ，几乎不存在于正常人 。 AGTCTCTATGGCAGACCCTAGACC 一3)，Skp2反 义 经过免疫逃避未被清除的CTCs可以发展为转移灶，而 (5 一T兀CTGGAGATTCrITITI’CTGTAGCC一3)。hTERT 且可以形成循环微癌栓 。因此 ，CTCs的检测不仅 正义 (5 一CGGAAGAGTGTCTGGAGCAA一3)．hTERT 与肿瘤转移、复发和预后评估有密切关系而且对肺癌 反义 (5 一GGATGAAGCGGAGTCTGGA一3)。TTF正 的早期诊断也具有潜在价值。本研究检测 NSCLC相 义 (5 一TACCAGGACACCATGAGGAA一3)，rrF反义 关标志基因 hTERT、Skp2、TTF一1mRNA表达情况并 (5一CGCCGACAGGTACTTCTGTI一3)。在合适的条 探索其联合检测对于早期诊断NSCLC的临床意义。 件下行实时荧光定量 PCR反应。 现报告如下。