IL-4和IL-13基因多态性与广东惠州地区儿童哮喘发生的相关性.pdfVIP

广东医学 2015年 4月 第36卷第 8期 GuangdongMedicalJournal Apr．2015，Vo1．36．No．8 · 1203 · IL一4和IL一13基因多态性与广东惠州地区儿童 哮喘发生的相关性水 闰梅，杨坤祥 广东省惠州市第一妇幼保健院检验科(516007) 【摘要l 目的 探讨IL一13(Arg130Gln)、IL一4(一589C／T)基因位点多态性与广东惠州地区儿童哮喘发生 的相关性。方法 采用PCR—RFLP法对 34例广 东籍哮喘患儿 (哮喘组)及 30例健康对照儿童 (对照组)进行 IL—l3(Arg130Gin)、IL一4(一589C／T)位点的单核苷酸多态性检测。结果 哮喘组与对照组 IL一13(Argl30Gln) 位点的基因型和等位基 因频率差异有统计学意义(P0．05)；哮喘组与对照组IL一4(一589C／T)位点的基因型和 等位基因频率差异无统计学意义(P0．05)；IL一13(Argl30Gin)基因型AA及AG致儿童哮喘发生的相对危险度 要高于基因型GG(P0．05)。结论 IL一13(Arg130Gln)基 因多态性可能与广东惠州地区儿童哮喘发生存在相 关性，并且基因型AA及AG对哮喘发生相对易感。 【关键词】 哮喘；基因多态性；IL一13；IL一4 支气管哮喘(简称哮喘)是一种多基因遗传病，环 TaKaRa生物技术有限公司；限制性 内切酶 (Nla1V、 境及基因因素相互作用与本病发生密切相关。细胞因 BsmF1)NewEnglandBiolabs(美国)；IL一4基因(一589C／ 子是启动和调控免疫细胞之间复杂交往 的介质 ，在哮 T)引物设计参照文献 (GenebankaccessM23442)，P1： 喘发病的病理生理过程中起着重要 的作用。IL一13、 5 一TGGGTAAGGACCTIATGGACC一3，P2：5 一GGTG- IL一4是一种 Th2型细胞因子 ，编码基因位于染色体 GCATCTrGGAAACTGT一3；IL一13基 因 (Argl30Gln) 5q31～33，是调节 IgE合成的重要基因，该基因的变异 引物设计参照文献 (GenebankaccessU31120)，P3：5一 可导致相关蛋 白产生的失衡。IL一13(Argl30Gln)及 CTTCCGTGAGGACTGAATGAGACGGTC 一 3 ，P4：5 一 IL一4基因启动子区一589C／T多态性在有些地区已 GCAAATAATGAGCTICGAAGrITITrCAGTGGA一3，弓I物 经报道与哮喘发生存在相关性，有些区域则未发现 合成宝生物工程大连有限公司。 其存在关联 ，基于可能存在的地域差异 ，我们应用 1．2．2 PCR扩增步骤 PCR反应总体系50 L：含蒸 PCR—RFLP方法检测广东惠州地区儿童人群 IL一13、 馏水35 L，10×PCR缓冲液5LIL，dNTP4LIL，上下游 IL一4基因多态性及了解单倍型的特点，旨在探讨 IL一 引物 (10pmo~LiL)各2 L，基因组 DNA2LIL；反应条 13、IL一4基因多态性与广东地区儿童哮喘发生之间的 件：94℃预变性6min，待60℃时加0．4 TaqDNA聚合 关系，确定哮喘易感个体，进一步了解哮喘遗传学发病 酶，然后94℃变性 15S，6o℃退火30S，72cI=延伸30S，共 机制。 33个循环，72℃终末延伸5min。 1 资料与方法 1．2．3 IL一13(Argl30Gln)及 IL一4(C一589T)位 点 1．1 一般资料 选取2012年 12月至2013年6月我 酶切步骤 IL一4(C一589T)基因酶切反应总体系20 院住院治疗的支气管哮喘急性发作 的惠州籍患儿 34 L：蒸馏水 1．3 L，10×NE缓冲液 2LIL，100×BSA 例作为哮喘组 ，其中男 21例 ，女 13例 ，年龄 6个月至 0．2LIL，PCR产物 (DNA)15ILL，BsmF1enzyme1．5 L， 14岁