丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模型肺内VEGF表达的影响.pdfVIP

新中医 2008年2月 第4O卷第2期 JOURNAL OF NEW CHlNESE MEDlClNE FEBRUARY 2008 Vo1．40 No．2 ·95‘ 实验研究 [文章编号】0256—7415(2008)02—0095—02 丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模型肺内VEGF表达的影响 许银姬，林琳，周明娟 广东省中医院，广东 广州 510120 I摘要】目的：观察丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模型肺内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法：建 立吸烟致大鼠肺气肿模型，观察丹参注射液对肺气肿大鼠血清、肺组织匀浆中VEGF含量及肺组织内VEGF表达的 影响：结果：丹参注射液可减轻吸烟致肺气肿大鼠模型血清及肺组织匀浆中VEGF含量的降低，增强肺泡上皮细 胞、支气管上皮细胞中VEGF的表达。结论：丹参注射液可能通过调节VEGF的表达而阻押吸烟致肺气肿的发生。 【关键词】丹参注射液；肺气肿；血管内皮生长因子类；疾病模型，动物；大鼠 f中图分类号1R285．5；R259．633；R一332 【文献标识码】A 肺气肿是现今严重影响人类健康的重大疾病之一。吸烟是 鼠VEGF试剂盒为晶美公司产品，认真按说明书进行操作，测 肺气肿最主要的病因，而血管内皮生长因子(vascular endothe． 定结果在酶标仪(波长450nm J读光密度值，绘制标准曲线，求 1ial growth~ctor，VEGF J与肺气肿的发生有关，但是关于 得血清VEGF的相对含量。③肺组织匀浆VEGF含量测定。取 VEGF在吸烟相关肺气肿发病过程中的作用研究尚未深入。丹 左肺组织称重后，于预冷的 100％甲醇液中进行匀浆、离心、 参可抑制多种细胞 VEGF的表达或抑制VEGF引起的血管通透 取上清液备测。检测方法同血清VEGF含量测定。④肺组织 性的增加，但是对吸烟相关肺气肿肺组织中VEGF的表达的影 VEGF免疫组化染色。组织切片常规染色、水化；PBS冲洗3 响研究尚少。故笔者进行了丹参注射液对吸烟致大鼠肺气肿模 次，每次3分钟；3％过氧化氢室温孵育10～15分钟，消除内 型肺内VEGF表达影响的实验研究，结果报道如下。 源性过氧化氢酶；PBS冲洗3次，每次2分钟；在抗原修复液 1 材料与方法 中高压1．5分钟，自然冷却；加一抗孵育，室温6O分钟；缓 1．1 动物分组和处理 37只sD大鼠，SPF级，体重12O～ 冲液洗3次，每次3分钟；加二抗孵育，室温3O分钟；缓冲 150g，由广州中医药大学实验动物中心提供 (合格证号 液洗3次，每次3分钟；选择DAB显色；复染、封片。 0004773) 随机分为空白组(14只)、模型组(10只)、丹参组 1．3 统计学处理 采用SPSS1 1．0软件包，计量资料以(互± (1 3只)。空白组置于室内正常喂养。模型组参照李红梅法… s)表示，各组之间比较用单因素方差分析；等级资料采用秩和 建立大鼠肺气肿模型。放人吸烟箱中，每次燃烧1O支香烟(红 检验。 双喜牌，广州卷烟二厂生产)，约0、5小时，每天2次，每周 2 结果 5天，连续 1月。并在第 1、14天经气管注人 1mg／mL内毒素 2．1 血清VEGF含量比较 见表1。血清VEGF含量，空白 200#L：丹参组造模方法同模型组，并于每次吸烟前腹腔注射 组最高，丹参组次之，模型组最低，3组问比较，差异均有非 丹参注射液2ml·kg--(广东永康药业股份有限公司生产，批号 常显著性意义(P0．01)。 703058)。 2．2 肺组织匀浆VEGF含量比较 见表 2。肺组织匀浆 1．2 标本采集及检测 ①光镜观察。以2％戊巴比妥钠 VEGF含量，丹参组最高，空白组次之，模型组最低，3组间 50nlg·