Matrigel胶对大鼠海马神经干细胞增殖及分化的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) Mar． 2014 Vo1．49 No．2 · 157 · issn．1671．6825．2014．02．005 dol：10．13705／j． M atrigel胶对大鼠海马神经干细胞增殖及分化的影响 邓 鑫，宋来君 ，郭新宾 郑州大学第一附属医院神经外科 郑州 450052 #通讯作者 ，男，1952年 9月生，教授，主任医师 ，研究方向：神经外科的基础与临床，E-mail：laijunsong@126．corn 关键词 神经干细胞 ；Matrigel胶 ；巢蛋白；31-tubulinnl；胶质纤维酸性蛋白；大 鼠 中图分类号 Q189 摘要 目的：观察 Matrigel胶对大 鼠海马神经干细胞 (NSCs)增殖和分化的影响。方法 ：自出生 24h内SD大鼠 海马组织提取 NSCs，取培养第 3代细胞 ，通过 Nestin蛋 白免疫细胞化学染色进行鉴定 。取第 3代细胞分为4组，A 组接种于多聚赖氨酸包被 24孔板 ，加入正常培养基 ；B组接种于多聚赖氨酸包被 24孔板 ，加入含胎牛血清 的 DMEM／F12培养基 ；C组接种于 Matrigel胶 内，加入正常培养基 ；D组接种于 Matrigel胶 内，加入含胎牛血清 的 DMEM／F12培养基。培养 1周后 ，通过免疫荧光染色方法检测NSCs中巢蛋 白(Nestin)、3-tubulinⅢ、胶质纤维酸性 蛋 白(GFAP)的表达情况。结果：第 3代培养细胞 Nestin蛋 白阳性，证实为 NSCs。A组 NSCs分化缓慢 ，B、C、D组 NSCs分化迅速 ，C、D两组 中NSCs形成立体的网状结构 。4组 NSCs中Nestin、B—tubulinⅢ、GFAP蛋白免疫荧光染色 阳性率差异有统计学意义 (FJ啬 分别为 3918．000、437．023和 3395．000，F 分别为 291．234、4833．000和 50．081，P均 0．001)，表 明B、c、D组 NSCs分化显著，且 c、D两组 中NSCs向神经元分化趋势明显，c组 NSCs向 神经元分化趋势最强 。结论 ：Matrigel胶具有诱导 NSCs向神经元分化 的作用 。 EffectofMatrigelontheproliferationanddifferentiationofrathippocam- palneuralstem cells DENGXin，SONGLaqun，GUOXinbin DepartmentofNeurosurgery，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 Keywords neuralstem cell；Matrigel；Nestin；B—tubulinⅢ ；glialfibrillaryacidicprotein；rat Abstract Aim ：ToobservetheeffectofMatrigelontheproliferation anddifferentiationofrathippocampusneural sterncells(NSCs)．Methods：NSCswereextractedfrom newbornSDratshippocampus，andthecellsafter3generations wereidentified throughNestin cytochemicalstaining．TheNSCswereallocatedintofourgroups：groupA wasinoculatedon 24一wellplatecoatedbypoly·lysineandaddednormalculturemedium ；groupB wasinoculatedon24一wellplatecoatedby poly—lysine and added DMEM／F12 medium containing fetal bovine serum ； group C was inoculated on 24一well }国家 自然科学基金资助项 目 3406