血小板、 红细胞对T细胞亚群的调控作用.docVIP

　　血小板、 红细胞对T细胞亚群的调控作用 ：初明梅, 钱宝华*, 王海峰, 查占山, 花美仙, 郭峰 【摘要】 　　目的: 在体外实验中, 探讨血小板和红细胞对T细胞亚群的调控作用。 方法: 流式细胞术测定血小板CD59、 红细胞CD59、 T细胞CD3+CD4+、 CD3+CD8+的表达水平。按不同的实验条件进行分组, 全血细胞组、 有PL无红细胞(RBC)组、 无血小板(PL)组、 无RBC无PL组。同时观测各组抗原刺激前后T细胞变化。结果: 各组T细胞CD3+CD4+、 CD3+CD4+/CD3+比较: 全血细胞组gt;有PL无RBC组, 抗原刺激前后（Plt;0.001）; 有PL无RBC组gt;无RBC无PL组刺激前(Pgt;0.05)刺激后（Plt;0.05）。各组T细胞CD3+CD8+表达无明显变化。各组CD3+CD8+/CD3+比较: 全血细胞组lt;有PL无RBC组抗原刺激前后（Plt;0.01）; 有PL无RBC组lt;无RBC无PL组刺激前（Pgt;0.05）刺激后（Plt;0.05）。全血细胞组和无PL组比较各项指标均无统计学意义（Pgt;0.05）。抗原刺激前RBCCD59与CD3+CD4+在全血细胞组中负相关（Plt;0.05）; 而在无PL组中则无相关性; PLCD59与CD3+CD8+CD3+全血细胞组中的正相关无统计学意义(Pgt;0.05); 而在无红细胞组中则呈负相关（Plt;0.05）。结论: 活化血小板、 红细胞均可正向调节CD3+CD4+/CD3+, 负向调节CD3+CD8+/CD3+。 【关键词】 血小板 红细胞 CD4+T细胞 CD8+T细胞 CD59 　　机体免疫应答是一个非常复杂的过程, 需要淋巴细胞和许多免疫细胞共同协调作用来完成。以往研究表明, 由于免疫系统的调节机制复杂, 细胞、 细胞因子微环境等多种因素影响着免疫应答的程度。血液系统如何维持一种免疫平衡状态仍未被充分认识。由于特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenia purpura, ITP）、 系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）等自身免疫病的免疫失衡状态不同, 临床表现变化多样, 临床 治疗 也只能局限于治标不治本的方法。认清免疫系统的平衡调节过程具有重要的临床意义和应用价值。本实验初步探讨了正常人外周血中血小板（platelet, PL）和红细胞(red blood cell, RBC)调控T淋巴细胞亚群相互协调的关系。 　　 1 材料和方法 　　1.1 材料 健康成人(7名, 男性, 年龄35～45岁)ACD抗凝新鲜全血由 中国 人民解放军上海血站提供。红细胞裂解液（10倍）、 抗CD59单克隆抗体（mAb）、 抗CD3/CD4多克隆抗体、 抗CD3/CD8多克隆抗体均购于美国BD公司。S180（5×109/L）为长海 医院 输血科免疫实验室提供。 　　1.2 方法 　　1.2.1 红细胞和白细胞混合液(SRBC+测定各组PLCD59、 RBCCD59和T淋巴细胞CD3+CD4+、 CD3+CD8+的表达。采用直接免疫荧光法, 抗CD59 mAb, 抗CD3/CD4多克隆抗体、 抗CD3/CD8多克隆抗体分别为CD59PE标记、 CD3FITC标记、 CD4PE标记、 CD8PE标记, 结果用Cell Quest软件分析。 　　1.2.7 统计学处理 组间比较采用LSDt检验, 变量间关系研究采用相关分析, 应用SPSS11.5软件进行统计处理。 　　表1 各组T淋巴细胞CD3+CD4+、 CD3+CD8+表达 （略） 　　aPlt;0.05 vs有PL无RBC组; bPlt;0.01 vs 全血细胞组. 　　2.2 各组CD3+CD4+/ CD3+、 CD3+CD8+/CD3+的变化结果 各组CD3+CD4+/CD3+比较: 有无S180刺激, 全血细胞组gt;有PL无RBC 组（Plt;0.001）; 有PL无RBC组gt;无RBC无PL组刺激前(Pgt;0.05)刺激后(Plt;0.05）。各组CD3+CD8+/ CD3+比较: 全血细胞组lt;有PL无RBC组S180刺激前后（Plt;0.01）; 有PL无RBC组lt;无RBC无PL组刺激前(Pgt;0.05)刺激后（Plt;0.05）。全血细胞组与无PL组比较各指标均无统计学意义（Pgt;0.05, 表2）。 　　表2 各组CD3+CD4+/CD3+、 CD3+CD8+/ CD3+的结果（略） 　　aPlt;0.05 vs有PL无RBC组; bPlt;0.01 vs全血细胞组. 　　2.3 无刺激各组PLCD59、 RBCCD59与CD3+