紫外光谱法测定蔬菜中维生素C含量.docxVIP

生物仪器分析 课程 实 验 报 告 班级姓名： 开课时间：2016－2017学年第 2学期 授课教师： 实验名称：紫外光谱法测定蔬菜中维生素C含量实验成绩实验者：刘盈璇同组者：聂洒洒、唐乙芳实验时间2017.3.24实验目的 掌握紫外分光光度计的基本结构与操作方法。 掌握紫外光谱法测定蔬菜中维生素C含量的基本原理和方法。 实验原理 蔬菜中维生素C的测定方法较多，目前主要有2,6-二氯靛酚滴定法、碘量法、2,4-二硝基苯肼法、荧光分光光度法等等。本实验主要利用维生素C是六碳的多羟基内酯，含有烯二醇基的化合物，在紫外区范围内有吸收，在波长246nm有最大吸收。直接用紫外光谱法测定新鲜蔬菜中维生素C含量，具有操作简便、准确、快速、检出限低的特性。 实验简要步骤（最好以流程图形式表达） 仪器准备：752紫外-分光光度计（石英比色皿）、高速离心机、50mL离心管、25mL比色管（7支）、1mL和5mL移液管、100mL容量瓶、研磨皿等。 试剂及材料准备: （1）偏磷酸（AR），维生素C标准试剂 （2）维生素C储备液（1.0mg/mL）：称取0.1g（精确至0.1mg）维生素C，用少量2%偏磷酸溶解后转移至100mL容量瓶中，用偏磷酸稀释至刻度，摇匀，存放于冰箱中备用。取10mL上述储备液加2%偏磷酸定容至100mL容量瓶中，即即得0.1mg/mL的维生素C标准溶液。 （3）样品：新鲜蔬菜（黄瓜） 3、752紫外-分光光度计操作步骤： 开机后预热20~30min； 选定波长（设定参数），稳定几分钟后在进行下一步操作； 调零； 测定样品； 关机。 4、标准曲线的制作： 分别吸取0.00、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mL含0.1mg/mL的维生素C标准溶液于7支洁净、干燥的25mL比色管中，用2%偏磷酸溶液稀释至刻度，摇匀。以2%偏磷酸为参比，在246nm处用1cm石英比色皿测其吸光度值，以吸光度A为纵坐标，维生素C浓度c为横坐标绘制标准曲线。 5、样品处理与测定 取10g新鲜蔬菜，冲洗干净，加等量的2%偏磷酸溶液，用组织捣碎机碎成匀浆，取适量匀浆转至100mL的容量瓶中，加2%偏磷酸溶液稀释至刻度，摇匀。在3000r/min的高速离心机中离心15min，移取离心管上层清夜10.00mL，用2%偏磷酸溶液稀释定容至100mL。 以2%偏磷酸为参比，在246nm处用1cm石英比色皿测其吸光度值。 实验结果与分析 提供实验过程图片、实验结果图片、实验结果数据表及相关分析。 1、维生素C标准曲线 标准使用液序号1234567标准使用液(mg/mL)0.000.0010.0020.0040.0060.0080.01吸光度A0.0000.0550.1080.2210.3330.4310.543 2、样品吸光度A 123吸光度A0.1160.1130.115平均值3、维生素C标准曲线的绘制 总结与体会（此部分手写）。 注： 1、实验报告用A4纸打印，将所有实验装订为1册上交。 2、第一、二、三项请自己组织语言简明扼要叙述。 3、第四项请认真分析，严禁抄袭，实验过程中注意多记录，多收集图片等实验结果信息。 4、第五项总结与体会请手写。