三氧化二砷对乳癌细胞系MDA-MB-468雌激素受体表达的影响.pdfVIP

JournalofZhengzhouUniversity(MedicalSciences) Mar． 2012 Vo1．47 No．2 doi：10．3969／j．issn．1671—6825．2012．02．016 三氧化二砷对乳癌细胞 系 MDA-MB-468雌激素受体表达 的 影响 孙晓娟，岳冬丽，倪渐凤，张伟杰，王留兴 郑州大学第一附属医院肿瘤科 郑州 450052 群通讯作者 ，男，1952年2月生 ，本科 ，主任医师，研究方向：恶性肿瘤 的综合治疗 ，E—mail：wlx2246@yahoo．com．an 关键诃 乳癌 ；三氧化二砷 ；甲基化 ；雌激素受体 中图分类 号 R737．9 摘要 目的：探讨_唧氧化二砷 (AsO)对人雌激素受体 d(ERa)阴性 的乳癌细胞株 MDA—MB-468进行药物诱 导后 ERot启动子 CPG岛的甲基化状态及蛋白的变化 。方法 ：常规培养 MDA—MB-468细胞 ，采用 MTT法检测 0．5、 1．0、2．0、4．0、8．0和 16．0mmol／LAs，O 分别处理 24、48和 72h后细胞 的生长抑制率 ，甲基化特异性 PCR检测 1．0、2．0、4．0Ixmol／LAs，0 处理 72h后 MDA—MB-468细胞 ERa启动子 CpG岛的 甲基化状态 ，Westernblot检测 1．0、2．0、4．0Ixmol／LAs，0 处理 72h后 MDA—MB-468细胞 ERa蛋 白的表达情况。结果 ：AsO 可抑制 MDA—MB． 468细胞增殖 ，其作用呈时间和剂量依赖性 (F =375．603，F 可{=474．827，P0．001)。经 1．0、2．0、4．0txmol／L As0 处理后 的MDA—MB-468细胞启动子 CpG岛 甲基化水平 降低 ，ERa蛋 白重新表达 。结论 ：AsO 明显抑制 MDA—MB-468增殖 ，适 当浓度 As，O 能诱导 ERa去甲基化 ，使 ERct阴性 的MDA—MB-468细胞恢复表达 ERa。 Influenceofestrogenreceptor一0【expression inbreastcancerMDA—MB一 468 cellsafterarsenictrioxidetreatment SUNXiaojuan，YUEDongli，NIJianfeng，ZHANGWeijie，WANGLiuxing DepartmentofOncology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052 Keywords breastcancer；arsenictrioxide；methylation；estrogenreceptor一0【 Abstract Aim：TostudytheDNAandproteinchangeofestrogenreceptor一0【(ERa)aftertreatmentwithdifferent concentrationsofarsenictrioxideinbreastcancercellMDA MB-468．Methods：MDA—MB-468cellswerecollected．MTT methodwasused toanalyzecellgrowth activityafterarsenictrioxidetreatmentby24，48，72h．Methylation—specificPCR wasutilized to detectthemethylationstatusofCpG islandofthepromoterofERctgeneandwesternblottoanalyseexpres— sion ofERaprotein．ResuIts：Arsenic trioxide inhibitsproliferation ofMDA—MB-468 ceils，whichhad thedose—effectand time—effect(F。 。=375．603，F… =474．827，P0．001)．CpGislandofMDA—MB-468cellsdemethylatedaftertreated by 1．0，2．0，4．0 Ixmol／L arsenictrioxide．TheERaprot