三羟基二苯乙烯及其对肺动脉平滑肌细胞生长抑制和致凋亡作用的研究.pdfVIP

390 ， 2。2，37(4) ．／／w— c— ea-o -／／ sm-net 三羟基二苯乙烯及其对肺动脉平滑肌细胞 生长抑制和致凋亡作用的研究 王欣 ，谢立 ，胡建国 ，蒋新宇 ，向大雄。，高洁生 ，高戈， (中南大学 1．湘雅二医院心胸外科 ，长沙41001l；2．化学技术学院，长沙410083； 3．湘雅二医院药剂科，长沙 410011；4．湘雅二医院风湿免疫科，长沙410011； 5．湘雅医学院检验系，长沙410013；6．湘雅医学院生理学教研室，长沙410013) 【摘要 】目的：以虎杖为原料提取的白藜芦醇 (Res)，再经甲基化反应合成的3，5，4_『三羟基二苯乙烯f3，5， 4’一trimethoxystilbene，TMS)，对 TMS进行结构鉴定和药代动力学测定。检测TMS对肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)的生 长抑制和致凋亡作用。方法：用紫外吸收光谱、红外吸收光谱、H—NMR谱、”C．NMR图谱、质谱检测等方法对TMS 进行结构鉴定。测定大鼠口服 TMS后的生物利用度，肠道吸收特点，体内组织分布和体内排泄。测定TMS对小鼠的 急性毒性。利用大 鼠肺动脉制备PASMCs。将细胞分为8组。A组 f空 白对照组)：不加 TNF．，TMS，Res；B组 fTNF．cc 组 )：100pg／mLTNF-“；C～E组 (低 ～高浓度 TMS组)：TNF．c【(100pg／mL)+TMS(5，10，200mol／L)；F～H组 (低 ～高 浓 度 Res组 )：TNF-c【(100pg／mL)+Res(50，100，200~mol／L)。MTT法测 定 TMS对 PASMCs增 殖 的影 响。流 式 AnnexinV／PI法测定TMS对PASMCs凋亡的影响。结果：TMS的紫外吸收图谱为 …fMe。 318，306．2，217．8 nm；红外光谱解析为IRvKBr／cm：2999，2935，2836，1591，1511，1456~m；H—NMR谱解析显示结构含有 3个羟基； C．NMR图谱解析为 17个碳信号，并且其结构中含有对称的结构片段。质谱图谱解析为ESI—MSm／z：271[M+H]， 256[M+H—CH，]，2411256一CH]，相对分子质量为 270，推测分子式为C。H O，结构中含有 甲基 。样品元素分析得分 子结构式可用 cH O表示，因此可确定化合物为反 一3，5，4’一三羟基二苯乙烯。TMS绝对生物利用度为 45．4％， 在小肠上段有较好吸收，通过粪便、胆汁排泄，在各组织中均有分布，最大耐受量 fMTD)约 5．85g／kg。TMS干预 PASMCs24h后经MTT法测定显示对其生长具有显著的抑制作用，其强度呈剂量依赖性改变。A～H组的生长抑制率 分另0为 (4．07±2．12)％，(6．54±4．78)％，(9．35±4．26)％，(16．75±5．34)％，(23．74-I-7．07)％，(6．78±5．58)％，(8．81±5．16)％， (17．81±6．031％。流式AnnexinV／PI法检测结果显示：TMS干预PASMCs24h组细胞凋亡率显著高于TNF．c【干预组， 且其作用呈剂量依赖性。A～H组的细胞凋亡率分别为 (2．63±0．74)％，(3．54±0．81)％，(5．77±4．62)％，(11．68±5．35)％， (18．79±4．15)％，(4．11±3．59)％，(6．33±4．8)％，(12．47±5．06)％。结论：TMS的分子式可用cH。8O表示 ，结构式为反一3， 5，4’一三羟基二苯乙烯。TMS的生物利用度为45％。TMS呈剂量依赖性地抑制PASMCs的增殖并诱导其凋亡。 【关键词】反 一3，5，4一三羟基二苯乙烯；白藜芦醇；肺动脉高压；肺动脉平滑肌细胞；凋亡 DOI：10．3969／j．issn．1672—7347．2012．04．013 收稿fit期 (Dateofreception】：2011—01一l9 作者简介 (Biography)：王欣，博士，主治医师，主要从事心脏损伤方面的研究。 通信作者 (Correspondingauthor)：王欣，Email：wxbo