STR扩增及亲子鉴定.docVIP

亲子鉴定原理：在没有基因突变，分型错误的前提下,孩子的一对等位基因必定是一个来自父亲，一个来自母亲；孩子不可能带有双亲均没有的等位基因。目前运用STR作为遗传标记系统。 STR（short tandem repeat）：短串联重复序列（short tandem repeat, STR）是广泛存在于人类染色体DNA中的一类多态性遗传标记系统，因其存在范围广（平均16kb中即有一个STR基因座），核心序列小（2-7bp）且扩增产物长度均小于500bp，等位基因位点的数字即代表序列重复的次数。STR基因座的等位基因片断长度集中，故可对多个STR基因座进行复合扩增。复合扩增多个STR基因座，累计鉴别能力可以接近或达到DNA指纹水平。亲子鉴定的流程：样本采集-DNA提取-pcr扩增-测序。 伍新尧1，朱运良1，2，童大跃1，蔡贵庆1 陈 勇 （1．中山大学中山医学院法医学系，广东 广州 510080； 2．郑州大学基础医学院法医学教研室，河南 郑州 450000） 摘要：STR分型技术已经成为亲子鉴定的最重要的技术手段,但是国际上尚未有一套从理论和实践都证明可行的策略和可靠的判断标准。本文在教育部“211工程”基金等项目的资助下，进行了深入的研究，确定了如下的策略和判断标准。三联体亲子鉴定案：①最少检测15个STR基因座，若没有发现矛盾基因座，父权指数达10000，可以作出“肯定亲生关系”的结论；②若出现1个矛盾基因座，要增加检测基因座至17个；若发现有2个矛盾基因座，要增加检测至24个，没有新矛盾基因座发现时，父权指数达10000，可作出“肯定亲生关系”的结论；③如果出现3个矛盾STR基因座，则要继续增加检测STR基因座或其他遗传标记，再没出现新的矛盾现象，父权指数超过10000以后，亦可以作出“肯定亲生关系”的结论；④若有4个矛盾STR基因座，则作出“否定亲生关系”的结论。单亲案亲子鉴定：① 至少检测17个STR基因座，没有发现矛盾基因座时，作出“不排除亲生关系”的结论，②若发现有1矛盾基因座，增加检测至26个以上；若有2个矛盾基因座，要增加检测至36个以上，没有发现新的矛盾基因座，可作出 “不排除亲生关系”的结论，③如果出现3个或3个以上矛盾STR基因座，则应作出“否定亲生关系”的结论。本实验室的实践表明，按照上述策略和标准作出判断，未发现争议现象。这些策略和判断标准符合科学、公正原则，值得推广应用。 关键词： STR 亲子鉴定 亲权指数 标准 20多年来，随着我国国民经济的快速发展，人民生活水平的迅速提高，国际或地区间的交流急剧加速，城乡流动人口的快速增加，各种观念在迅速改变，各类媒体对亲子鉴定方面的科普知识也作了大力的宣传和普及工作，亲子鉴定在我国从开始的少数案例[1],迅速增加。这些年来，在我国各个地区，迅速成立了许多从事亲子鉴定的结构。单以广州市为例，过去（1990年以前）只有中山医科大学的法医学系从事亲子鉴定工作，但是，至今，已经有至少7家机构在从事这项工作。从全国范围来说，关于亲子鉴定工作，也没有统一的操作规范或技术守则，更没有统一的、科学的判断标准。因此，各个鉴定机构发出的鉴定报告的科学性、可靠性就必然存在这样那样的问题，甚至引起新的纠纷。显然，这种情况与加强法治建设和实现我国司法公正的要求是不相适应的。 1986年，英国科学家Jeffreys等【2】，采用全新的“DNA指纹”技术成功地鉴定了一例用传统的血型鉴定技术无法解决的移民案以后，亲子鉴定技术开始了直接分析DNA的新时代。由于DNA本身所具有的无比优越性和相关DNA分析技术的迅速发展，特别是一种称为微卫星DNA的STR（short tandem repeats,短串联重复序列）【3】被发现以后，应用DNA分析技术进行亲子鉴定，则更加普遍。STR序列广泛分布于各个染色体上，个体（或等位基因）之间的差异一般只表现为重复数目（因而造成该DNA片段长度）的差异。这些差异能简单地用PCR技术检测出来。同时，还发现这些长度差异的片段又是严格遵循孟德尔遗传规律遗传的，因而可以用来区分不同个体，并追溯个体的父母来源。这种技术比Jeffreys先前发现的“DNA指纹”分析技术更加简便，对实验室要求低、容易推广、容易进行标准化。这使亲子鉴定技术进入了全新的阶段。据估计，人类基因组中存在着20万个左右的STR基因座[4]。随着STR基因座发现的数量迅速增加，STR多基因座复合扩增技术的逐步成熟，多色荧光标记技术的发展，由美国FBI认可的13个CODIS基因座组成的试剂合的推广应用，相应的检测多色荧光的遗传分析仪的推出，使得同时检测13个或更多的STR基因座的分析技术迅速在全世界许多地区和机构得到广泛应用。这种分析技术一次实验的个体识别力可以达到1x10－17 ，其效力