棕榈酰五肽-3裂解条件的单因素实验.pdfVIP

承 德 医 学 院 学 报 J0URNAL OF CHENGDE MEDICAL C0LLEGE VO1．3lNo．52014 棕榈酰五肽一3裂解条件的单因素实验 王小青，赵红玲，高 杨，王良友，尹志峰 (河北省中药研究与开发重点实验室，承德医学院中药研究所，河北承德 067000) 【关键词】棕榈酰五肽一3；裂解条件；单因素实验 【中图分类号1Q78 文【献标识码】A 文【章编号11004-6879(2014)05—0419-02 棕榈酰五肽一3(Ma~ l，氨基酸序列为Pa】_I r__ 表1采用不同裂解时间的实验方法 Th卜I ，缩写为PAL-KTTKS)是棕榈酰寡肽系列 抗皱多肽小分子的一种，其抗皱作用的机制为模拟信号肽 KrrKs(来源于前胶原蛋白0【l链的水解产物)，通过促进 I 和Ⅲ型胶原蛋白和纤维粘连蛋白的生成，增加皮肤厚度及减 2．3 肽树脂裂解前反应方法的选择 将干燥至恒重的肽 少细 “。棕榈酰五肽一3是近年来兴起的一种化妆品原料， 树脂置于玻璃烧瓶中，分别按照表2)／11入裂解液反应。过滤， 但高昂的价格限制了其广泛应用…。本研究在前期工作的基 用少许TFA洗涤树脂，滤液用无水冰乙醚沉降，析出白色固 础上 ，对棕榈酰五肽一3的合成方法进行了优化，以期提高 体，400响pm离,~4min，弃去上清液，重复2次，真空干燥。 棕榈酰五肽一3的纯度，为工业化量产提供参考 。 表2 采用不同裂解前反应实验方法 1仪器与材料 戴安U3000高效液相色谱仪(UV检测器，美国戴安公 司)，Newstyle型反相高效半制备液相色谱仪(苏州汉邦科 技有限公司)，戴安液相色谱质谱联用仪Ultimate3000／ 2．4 肽树脂裂解液倍量的选择 将干燥至恒重的肽树脂 MSO(美国戴安公司)，CH 冻干机(北京博励行仪器有 置于玻璃烧瓶中，按照表3~JIl入裂解液反应2h。过滤，用少 限公司)，高速大容量离心机(上海安亭科学仪器厂)，固相合 许，n1A洗涤树脂，滤液用无水冰乙醚沉降，析出白色固体， 成载~wang树脂(天津南开合成科技有限公司，替代度为 400∞)m离,~4min，弃去上清液，重复2次，真空干燥。 1．17reotol／g)，CTC树脂(天津南开合成科技有限公司，替 表3采用不同裂解液倍量实验方法 代度为1．2mmol／g)肽链中所有保护氨基酸(成都诚诺新技 术有限公司)，HOBt与DIC(苏州中科天马肽工程中心有限 公司)，冰乙醚与 A(天津市风船化学试剂科技有限公司)， 哌啶、苯甲硫醚、间甲酚与苯甲醚(上海晶纯试剂有限公司)， 2．5 肽树脂裂解体系的选择 将干燥至恒重的肽树脂置 EDT(Sigma-Aldrich)，DMF(天津市科密欧化学试剂有限公 司)。 于玻璃烧瓶中，加入裂解液反应2h。过滤，用少许TFA洗涤 树脂，滤液用无水冰乙醚沉降，析出白色固体，40(O re离心 2方法 2．1 固相合成载体的选择 采用Fmoc固相多肽合成策略， 4min，弃去上清液，重复2次，真空干燥。 分别选择Wang树脂与CTC树脂分别按照附图所示的合成 表4采用不同裂解液体系的实验方法 路线图合成棕榈酰五肽一3。 w R“ 竺竺竺!： F煳铷(旧w蜘}Rd!兰 NH8佃 wgR H0B )【cD MAP