活化蛋白C对大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤的影响.pdfVIP

· 456 · 广东医学 2012年2月第 33卷第4期 GuangdongMedicalJournal Feb．2012，Vo1．33，No．4 活化蛋 白C对大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤的 影响米 陈诚 ，马成虎，穆殿超 ． 辽宁医学院附属第三医院普外科(辽宁锦州 121001) 【摘要】 目的 探讨大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤过程中炎症变化情况以及活化蛋白C (APC)对大鼠脂肪肝 缺血再灌注损伤的影响。方法 清洁级健康雄性Wistar大鼠60只，制备成脂肪肝模型后，随机分为假手术组、对 照组和APC组。APC组和对照组行部分肝缺血 50min，各组于再灌注6h和24h两个时间点，分另lJ对 1O只大鼠 取材，观察各组ALT、AST、TNF一0、【肝组织MPO含量、肝组织ICAM一1免疫组化染色和肝脏组织病理学改变等指 标。结果 APC组与对照组的ALT、AST、TNF—d、MPO和ICAM一1表达在各个时间点上均明显高于假手术组。 再灌注6h后与对照组比较，APC组ALT、AST、TNF一仅水平和MPO含量明显降低 ，ICAM一1的表达明显减弱。 光镜下观察肝形态学变化，对照组损伤甚为明显，APC组和假手术组损伤程度较对照组轻 ，假手术组更轻。再灌 注24h后，与对照组比较，APC组TNF—Ot水平明显降低，APC组与对照组其余各项指标间差异无统计学意义。 结论 APC通过抗炎和减少内皮细胞损伤，对大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤起保护作用。 【关键词】 活化蛋白C；脂肪肝缺血再灌注；大鼠 近年随着我 国社会经济的发展和生活水平的提 验试剂盒购于北京奇松生物科技有限公司。髓过氧化 高，脂肪肝的发病率逐年增高。在外科手术治疗的肝 物酶 (myeloperoxidase，MPO)试剂盒购于南京建成生物 脏疾病患者中，约20％合并有脂肪肝 ，在肝移植中供 工程研究所。免疫组化试剂盒黏附分子 1(ICAM一1)购 者脂肪肝的检出率达到30％…。与正常肝脏相 比，脂 于武汉博士德生物技术有限公司。 肪肝对缺血再灌注损伤 比正常肝脏更为敏感 ，脂肪 1．3 方 法 肝患者行肝叶切除和肝移植术后 ，效果较差 ，其机制与 1．3．1 脂肪肝模型的制备及动物分组 60只 Wistar 脂肪肝肝缺血再灌注损伤有关。炎症反应是肝缺血再 大鼠用美 国Teklad实验室缺乏胆碱和蛋氨酸 (CM— 灌注损伤的重要机制之一 ，肝细胞脂肪变使白细胞与 DD) 改 良配方的饲料 (江苏特洛菲饲料科技有限公 窦状内皮细胞黏附增加，Kuppfer细胞激活，释放炎性 司)喂养，21d后出现明显肝脂肪变性。脂肪肝病理诊 因子。人重组活化蛋 白C(recombinanthumanactivated 断标准：肉眼可见肝脏均匀增大，呈淡黄色，包膜紧张， proteinC，APC)是一种天然的抗凝剂，除了抗凝作用， 边缘较钝，质地略软，切面呈淡黄色而稍隆起，包膜外 许多研究 显示，APC通过抑制转录，抑制前炎性因子 翻，触之油腻感。低倍镜下，肝细胞脂肪变性 占肝小叶 的产生，达到抗炎作用。研究 显示在大鼠肝移植的 1／3～1／2者为轻度脂肪肝 ；占肝小叶 I／2～3／4者为中 模型中，保存液中添加 APC有助于减轻移植物 的损 度脂肪肝；占肝小叶3／4以上或者肝细胞弥漫脂肪性 害。APC可以有效地预防大 鼠肝缺血再灌注损伤 。 变性呈渔网状者为重度脂肪肝。脂肪肝造模成功后， 2010年9月至2011年5月，本研究探讨大鼠脂肪肝缺 将60只大鼠随机分为3组，每组20只，即：假手术组、 血再灌注损伤过程中炎症变化情况以及 APC对大 鼠 APC组及对照组 。 脂肪肝缺血再灌注损伤的影响，以期为脂肪肝缺血再 1．3．2 肝缺血再灌注模型的制备 实验前禁食 12h， 灌注损伤的l临床治疗和研究提供一种新的思路。 可以自由饮水。乙醚麻醉后 ，将大鼠放在垫有保温垫 1 材料与方法 的鼠台上，正中线剖腹，暴露肝脏，假手术组只接受麻