显微镜光路.docx

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显微镜光路

窗体顶端显微镜光路现代复合显微镜的目的是提供一个放大的二维图像,可在连续的焦平面的轴上汇聚,从而实现标本精细结构二维和三维的清晰成像。大多数显微镜配备有移动平台,这样能准确定位,定向,并聚焦到标本上,以优化可视性和图像记录。正确放置光阑,镜子,棱镜,分光镜,和其他光学元件可以控制整个显微镜的光通路照明方向和强度,达到所需的标本中的亮度和对比度程度。图1是尼康的Eclipse E600显微镜配备一个三目头和DXM-1200数码相机系统用于记录影像。由灯箱里钨卤化物灯提供照明,首先通过一个集光透镜,然后再通过光学显微镜底部进入光路。此外,照明光首先通过固定在显微镜底部的一系列滤光片,再经过镜子反射通过视场光阑。聚光镜形成一个光锥对移动平台上的样品进行照明,然后进入物镜。光通过物镜后,由分光器/棱镜进入目镜形成一个虚像,或直接通过安装在三目延长管上的投影透镜,然后在CCD光电二极管阵列上形成一个像。现代显微镜中的光学元件都安装在一个稳定的,符合人体工程学的底座上,可以实现快速转换,精确定位,仔细对齐那些光相互依存器件。总之,显微镜的光学和机械部件,包括安装在玻璃基片和盖玻片中的样品,形成一个经过中心轴的光路,通过显微镜底部和上部。光学显微镜光路通常由照明灯(包括光源和集光透镜),台下聚光镜,样品,物镜,目镜,和探测器,相机或观察者的眼睛(见表1)。研究级显微镜还包含几个照明光调节装置,通常放在照明光和聚光镜之间。配套的检测器或滤光片往往放在物镜和目镜或相机之间。调节装置和探测装置配合起来改变图像的对比度,例如空间频率,相位,偏振,吸收,荧光,离轴照明,标本和照明技术的其他性质。即使没有其他明确的设备来控制照明和对图像形成光进行滤波,甚至连最基本的显微镜配置,也会发生某种程度的自然滤波。显微镜组件属性照明光照明光源,收集透镜,视场光阑,热滤光片,光平衡滤光片,扩散器,中性密度滤光片光调节器聚光器光阑,暗场停止,孔径板,相位环,偏光镜,偏离中心的狭缝孔径,Nomarski棱镜,荧光激发滤光片聚光器数值孔径,焦距,畸变,光传输,,工作距离样品基片厚度,玻璃盖厚度,沉浸介质,吸收,透射,衍射,荧光,延迟,双折射物镜放大倍数,数值孔径,焦距,沉浸媒体,像差,光传输,光学传递函数,工作距离图像滤光片补偿器,分析仪,Nomarski棱镜,物镜光阑,相位板,SSEE滤光片,调制板,光传输,波长选择,荧光屏障滤光片目镜放大倍数,畸变,视场大小,眼点探测器人眼,感光乳剂,光电倍增管,光电二极管阵列,摄像机?表1显微镜的一些光学元件作为成像的原件,其他的主要是改善样品照明,也有过滤或转换功能。光学显微镜中参与成像的组件有集光透镜(照明灯内或者附近),聚光器,物镜,目镜(或眼),人眼或摄像机透镜。虽然其中的一些组件通常不是作为成像元件,但在决定最终显微图像质量上,其成像特性是至关重要的。对显微镜成像认识的基础是单个镜片的功能,也正是这些单个镜片组成了光路中的光学元件。最简单的成像元件是一个理想透镜(图2):理想玻璃,无色差,并汇聚到一个点。一个平行的傍轴光束通过会聚透镜,由于折射最终在焦点处汇聚成一个光点(点标在图2焦点)。这种镜片通常被称为正透镜,因为他们使汇聚的光汇聚的更迅速,或导致发散光束发散的慢。作为旁轴的平行光束,一个点光源放置在透镜的焦点处,当光通过透镜并离开透镜后形成一个平行的傍轴光束。在图2中由右至左。透镜和焦点之间的距离称为透镜的焦距(由图2中的距离F表示)。光学现象往往利用量子理论或波动力学来解释,取决于被描述的特定问题。在考虑透镜的功能,波动性经常被忽略,光可以认为是沿直线传播,被称作光线。简单的光线图足以说明显微镜的许多重要方面,包括折射,焦距,放大倍率,成像,和光阑。在其他情况下,把光认为是由离散粒子(量子)组成的光波更方便,尤其是当光线是由量子力学的事件或转变为其他形式的能量时。本次讨论将仅限于利用近轴光线的光学透镜模型,符合光的波动性质和简单的线图,其中光从左至右的。近轴光线传播方向非常接近光轴,入射角和折射角都非常小,以弧度为单位时,可以考虑和他们的正弦值相等。对于平行光束来说,个别单色光波形成一个波阵列,振动方向垂直于波传播方向的电场和磁场向量组合形成了一个波前。通过理想透镜后,它由平面波转换为球面波,以透镜焦点(图2)为中心。光波到达焦点后,会和其它光阵列发生破坏性干涉。另外,从一个理想透镜的焦点处产生的球形波前所产生的光经透镜后转换成平面波(图2从右到左)。每个平面波的光线经过透镜时发生不同的方向变化,因为它在到达表面的入射角各不相同。在透镜中出现的,也改变光线的方向。在实际系统中,一个透镜或透镜组折射的角度和焦点取决于厚度,几何形状,折射率,和系统中每个组成部分色散。一般情况下,一个透镜会将一个球面波转换成另一种球面

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