雷帕霉素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中对自然杀伤T细胞的调控作用.pdfVIP

·2678· 生堡塞墼处整苤查!!!!生!!旦筮!!鲞箜!!塑 ·泌尿外科· 雷帕霉素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤中对 自然杀伤T细胞的调控作用 张潮 王硕王宣传李佳蔚戎瑞明 作者单位：200032上海，复旦大学附属中山医院泌尿外科(张潮、王硕、王宣传、 戎瑞明)；200032上海市器官移植重点实验室(李佳蔚) 张潮、王硕为共同第1作者 通信作者：戎瑞明，Email：rong．miming@zs—hospital．sh．ca DOI：10．3760／cma．j．issn．1001-9030．2016．12．017 【摘要】 目的观察新型免疫抑制剂雷帕霉素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤早期的保护作用及 其对自然杀伤T(NKT)细胞募集过程的影响。方法45只C57BIM6小鼠随机分为假手术(Sham) 组、缺血再灌注损伤(IR)组和雷帕霉素给药(Rapa)组，后两组建立双侧肾脏缺血再灌注损伤模型， d采集标本，评价肾功能和肾组织病理学损伤，采用原位缺口末端 Rapa组给予雷帕霉素灌胃，术后1 标记法(TUNEL)测定肾实质细胞凋亡水平并采用流式细胞术检测NKT细胞在脾脏、肾脏及外周血 的淋巴细胞中所占比例的变化，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT—qPCR)检测与NKT细胞迁 移相关的趋化因子的表达水平。结果Rapa组小鼠在肾脏缺血再灌注损伤的早期比较于IR组血 清肌酐和尿素氮水平明显下降，病理损伤减轻，肾脏实质细胞凋亡减少。Rapa组的NKT细胞在脾 4±0．007 9±0．006 脏总淋巴细胞中所占比例为(0．076 8)％，较IR组[(0．1160)％]显著下降(P 6±0．002 8)％，较IR组 0．05)。而Rapa组小鼠的外周血中NKT细胞所占比例为(0．205 0±0．001 [(0．132 2)％]显著上升(P0．05)。Rapa组的肾脏总淋巴细胞中NKT细胞所占比例为 9±0．000 8±0．001 (0．116 6)％，较IR组[(0．0223)％]也显著上升(P0．05)。Rapa组的肾脏组 织中CXC趋化因子配体9(CXCL9)和CXC趋化因子配体10(CXCLl0)mRNA表达水平分别0．74± O．04和0．72士0．01，其受体CXC趋化因子受体3(CXCR3)阳性的NKT细胞在肾脏总淋巴细胞中的 0±0．062 比例为(1．561 8)％，较IR组均明显增加(P0．05)。结论雷帕霉素可以通过趋化因子 CXCL9、CXCLl0及其受体CXCR3向肾脏募集具有保护作用的NKT细胞发挥对小鼠肾脏缺血再灌 注损伤的保护作用。 【关键词】 雷帕霉素； 肾脏；缺血再灌注损伤； 自然杀伤T细胞；趋化因子 基金项目：国家自然科学基金；上海市自然科学基金(12ZRl405500) of tonaturaIkillerTcellsinthemufine in- The effect ischemia—reperfusion regulatoryrapamycin model Chao，WangShuo，WangXuanchuan，LiJiawei，RongRuiming jury Zhang C， of Hospital，FudanUniversity，Shanghai200032，China(Zhang DepartmentUrology，Zhongshan LaboratoryofOrganTranplantation，Shanghai200032，