兔附件扭转复位后对卵巢缺血再灌注损伤的影响.docVIP

兔附件扭转复位后对卵巢缺血再灌注损伤的影响 于月新，李 巨，陈 佳，樊宝剑，颜宇博 （110001沈阳，解放军第二〇二医院妇产科） 【摘要 目的　观察兔附件扭转复位后卵巢缺血再灌注损伤生化指标的变化。方法　将雌性成年日本大耳白兔40只分实验组(n=32)和对照组（n=8），实验组先建立兔附件扭转模型，附件扭转24 h后解除扭转并将之分成4组，每组8只，分别于24、48、72、96 h后取双侧卵巢组织，检测卵巢丙二醛(MDA)、诱导型NOS(iNOS)和超氧化物歧化酶(SOD)的变化。结果　与对照组比较，实验组再灌注各时相卵巢组织中MDA升高，48 h达高峰，72 h开始下降，96 h接近正常。SOD生化检测值24 h最低，72 h开始升高，96 h接近正常；实验组卵巢均有iNOS程度不等升高，随时间进展，48 h组达高峰，72 h下降。结论　附件扭转后解除扭转对卵巢产生了明显的再灌注损伤，48 h损伤最明显，损伤的逐渐恢复可能与局部产生的代谢毒物逐渐清除等因素有关。  附件扭转（adnexal torsion，AT）是妇科常见的急腹症之一。蒂扭转发生后，卵巢静脉和动脉血流依次受阻，如不及时诊治可造成卵巢不可逆转的坏死等严重并发症。为此我们建立兔附件扭转的动物模型，观察卵巢扭转后的再灌注损伤情况，为临床提供实验。1　 材料与方法 雌性成年日本大耳白兔40只，8～12月龄，体质量2.5～3.0 kg，由沈阳军区总医院实验动物中心提供[合格证号：SCXK(军)2007-001]组(n=32)和对照组（n=8兔称重后氯胺酮40 mg/kg肌注射，待四肢松软、睫毛反射消失后将其仰卧固定于手术台。取下腹部正中切口入腹腔，暴露双侧子宫和输卵管、卵巢，将组兔的左侧附件按顺时针方向旋转3周，观察卵巢由灰白在1后变成红色将之固定于左侧腹壁。24后解除扭转，分成4组，每组8只，分别于24、48、72、96 h后取双侧卵巢组织。组仅开腹后提拉出左侧附件至切口，再放回原处关腹96 h后取双侧卵巢组织。所有兔以右侧卵巢为内对照。1.2 实验耗材及试剂丙二醛(MDA)、诱导型NOS(iNOS)和超氧化物歧化酶(SOD)生化检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 1.3　主要观察指标 11 一般状态 术前及术后观察研究对象饮食、睡眠、大小便精神状态体。于手术开腹时观察子宫、输卵管及卵巢的大小颜色盆腔情况。1.3.2生化指标检测 　取摘除之左侧1/2卵巢，置于80℃保存。收标本按南京建成生物工程研究所提供检测试剂盒说明书操作测定。1.4　统计学分析用SPSS 13.0软件正态分布的计量资料以x±s表示多个独立样本间的多重比较扩展的t检验。 2.1　　24h后只（/8）兔卵巢及输卵管呈浅红色，只（/8）呈深红色，1只（1/8）呈蓝黑色； 48 h有只（/8）卵巢及输卵管呈浅红色，只（3/8）呈深红色，只（/8）呈蓝黑色； h后6只（6/8）呈浅红色对照组未见明显异常。SOD、MDAiNOS的变化与对照组比较组再灌注时点中MDA升高(P0.05)(P0.01)，72 h后下降，与48 h相比，差异有统计学意义（P0.05）。卵巢组织匀浆中iNOS 24、48 h升高(P0.05)(P0.05)。与对照组相比，24、48h卵巢SOD下降(P0.05)，48 h时达高峰(P0.01)，72 h升高(P0.05)，96 h后接近正常(P0.05)。见表。SOD (U/mg) MDA (nmol/mg) iNOS（U/mg ) 假手术组3.312±0.951 0.328±0.156 1.415±0.416 内对照5.731±0.879 0.562±0.471 1.532±0.512 再灌注24h组1.562±0.482a 2.441±0.887a 3.222±0.984a 再灌注48h组2.926±1.325ab 3.783±1.391ab 4.881±1.220ab 再灌注72h组7.091±1.832ac 2.021±0.532a 4.493±1.133a 再灌注96h组4.961±1.221 0.601±0.227d 1.911±0.273 a：P0.01，与对照组比较；b：P0.05，与再灌注24h组比较；c:P0.05,与再灌注48h组比较;d：P0.05,与再灌注72h比较 3 讨论 AT是妇科急诊手术的第五大常见病因附件扭转后如何判断卵巢是否能够有效保留一直是人们研究的焦点MDA为脂质过氧化产物的一种，其含量可反映机体内脂质过氧化的程度，SOD的活性可反应组织内清除自由基的能力MDA与SOD的联合检测可体内自由基代谢的情况。本研究发现，实验组附件扭转24 h后，卵巢充血、水肿、局部变成紫色或黑色。h后卵巢及输卵管颜色5只呈紫色，2只呈