重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马线粒体凋亡途径相关调控因子的影响及作用机制.pdfVIP

· 23l0 · · 论 著 · 重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马线粒体 凋亡途径相关调控 因子的影响及作用机制 史志勤，卞红磊，魏艳静，尹晓琳 ，张 荣，梁文杰，刘瑞春 ，王维平，于江华 【摘要】 目的 观察重组人红细胞生成素 (rHuEPO)对戊四氮 (PTZ)点燃的癫痫持续状态 (SE)的成年雄 性 (SD)大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶 B (P—PKB／p—Akt)、Bcl一2相关x蛋 白 (Bax)和X一连锁凋亡抑制蛋 白 (XIAP)表达的影响，并进一步探讨rHuEPO作用的可能机制。方法 于2010年3月，由河北省实验动物中心提供的 健康清洁级成年SD大鼠。采用 PTZ点燃大鼠sE模型，将大鼠随机分为B组 (PTZ+0．9％氯化钠溶液)、C组 (PTZ +rHuEPO)、D组 (眦 +LY294002+rHuEPO)、E组 (PTZ+二 甲基亚砜 +rHuEPO)，同时另选取不进行 SE制模的 SD大鼠作为A组 (0．9％氯化钠溶液)，检测大鼠行为学和脑电图的改变；用原位末端转移酶标记技术 (TUNEL)检 测海马神经元的凋亡情况；免疫组织化学法观察P—Akt、Bax、XIAP的阳性细胞数；反转录多聚酶链反应 (RT—PCR) 方法检测各组大鼠海马Bax信使RNA (BaxmRNA)的表达；Westernblot方法检测各组大鼠海马蛋白激酶 B (Akt)、 P—Akt、XIAP蛋白的表达。结果 与B组比较 ，C组P—Akt、XIAP阳性细胞数和P—Akt、XIAP蛋白表达水平均增多， Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达水平均减少 ，差异有统计学意义 (P0．05)；与C组 比较，D组P—Akt、XIAP阳性 细胞数和P—Akt、XIAP蛋白表达水平均减少 ，Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达水平均增多，差异有统计学意义 (P 0．05)。结论 rHuEPO可以提高P—Akt、XIAP阳性细胞数及蛋白表达水平 ，降低Bax阳性细胞数及 BaxmRNA表达水 平，减少海马神经元的凋亡，发挥神经保护作用；加入磷脂酰肌醇3激酶 (PI3K)抑制剂 LY294002后，海马P—Akt、 XIAP阳性细胞数及蛋白表达减少 、Bax阳性细胞数及BaxmRNA表达增加，海马神经元的凋亡增加，减弱了rHuEPO的 保护作用。因此，PI3K／Akt信号通路是rHuEPO发挥神经保护作用的通路之一，其作用机制可能是rHuEPO活化 PI3K／ Akt后，提高P—Akt蛋白及线粒体凋亡途径相关调控因子 XIAP的表达，下调了Bax的表达，从而介导线粒体凋亡途 经，发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用。 【关键词】 癫痫持续状态；重组人红细胞生成素；磷酸肌醇3一激酶类；蛋 白激酶类；Bcl一2相关x蛋白质；X 连锁凋亡抑制蛋 白质 【中图分类号】R349．53 【文献标识码】A doi：10．3969／j．issn．1007—9572．2015．19．016 史志勤，卞红磊 ，魏艳静，等 ．重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马线粒体凋亡途径相关调控因子的影 响及作用机制 [J]．中国全科医学，2015，18(19)：2310—2316．[WWW．chinagp．net] ShiZQ，BianHL，WeiYJ，eta1．EffectsandpossiblemechanismofrHuEPOfortheregulatoryfactorsofthemitoehondrial — dependentapoptoticpathwayinthehippocampusregionofstaturalepilepticusrats[J]．ChineseGeneralPractice，2015，18 (19)：231O一2316． EffectsofrHuEPO ontheRegulatoryFactorsRelatedW iththeApoptosisPathwayofHippocampalM itochondriainRats WithSmtusEpilepticusandthePossibleMechanism SH／Zhi—qin，BIANHong—lei，WEIYan—ring，eta1．HebeiMedical University，Sh~iiazhuang050000，China 【Abstract】 Objective