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附件猪瘟活疫苗传代细胞源本品系用猪瘟病毒兔化弱毒株接种易感传代细胞培养收获培养物加适宜稳定剂经冷冻真空干燥制成用于预防猪瘟性状淡黄色海绵状疏松团块易与瓶壁脱离加稀释液后迅速溶解无菌检验按现行中国兽药典附录进行检验应无菌生长支原体检验按现行中国兽药典附录进行检验应无支原体生长外源病毒检验按现行中国兽药典附录进行检验应无外源病毒污染鉴别检验将疫苗用灭菌生理盐水稀释成为每毫升含有个兔的病毒悬液与等量的抗猪瘟病毒特异性血清充分混合置作用分钟其间振摇次同时设立病毒对照和生理盐水对照中和结束后分别耳静脉注射
附件
猪瘟活疫苗(传代细胞源)
Zhuwen Huoyimiao(ChuandaiXibao Yuan)
Classical Swine Fever Vaccine, Live(Cell Line Origin)
本品系用猪瘟病毒兔化弱毒株(CVCC AV1412)接种易感传代细胞培养,收获培养物,加适宜稳定剂,经冷冻真空干燥制成。用于预防猪瘟。
【性状】 淡黄色海绵状疏松团块,易与瓶壁脱离,加稀释液后迅速溶解。
【无菌检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验,应无菌生长。
【支原体检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验,应无支原体生长。
【外源病毒检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验,应无外源病毒污染。
【鉴别检验】 将疫苗用灭菌生理盐水稀释成为每毫升含有100个兔MID的病毒悬液,与等量的抗猪瘟病毒特异性血清充分混合,置10~15℃作用60分钟,其间振摇2~3次。同时设立病毒对照和生理盐水对照。中和结束后,分别耳静脉注射兔2只,每只1.0ml,按效力检验(1)项进行观察和判定。除病毒对照组应出现热反应外,其余2组在接种后120小时内应不出现热反应。
【安全检验】 选用无猪瘟病毒中和抗体(检测方法见附注)的健康猪,接种前观察5~7日,每日上、下午各测体温1次。挑选体温、精神、食欲正常的使用。每批疫苗按瓶签注明头份用灭菌生理盐水稀释成每毫升含6头份,肌肉注射猪5头,每头5.0ml(含30头份)。接种后,每日上、下午各观察并测体温1次,观察21日。体温、精神、食欲与接种前相比没有明显变化;或体温升高超过0.5℃,但不超过l.0℃,稽留不超过4个温次;或减食不超过l日,疫苗可判为合格。如果有l头猪体温升高l℃以上,但不超过1.5℃,稽留不超过2个温次,疫苗也可判为合格。如果有1头猪的反应超过上述标准;或出现可疑的其他体温反应和其他异常现象时,可用5头猪重检1次。重检的猪仍出现同样反应,疫苗应判为不合格。也可在猪高温期采血复归猪2头,每头肌肉注射可疑猪原血5.0ml,测温观察16日。如果均无反应,疫苗可判合格。如果第1次检验结果已经确证疫苗不安全,则不应进行重检。
【效力检验】 下列方法任择其一。
(1)用兔检验 按瓶签注明头份,将疫苗用灭菌生理盐水稀释成1/7500头份/ml,耳静脉注射体重1.5~3.0kg兔2只,每只l.0ml。接种后,上、下午各测体温1次,48小时后,每隔6小时测体温1次,根据体温反应和攻毒结果进行综合判定。
接种疫苗后,兔的体温反应标准如下:
定型热反应(++) 潜伏期48~96小时,体温上升呈明显曲线,至少有3个温次升高1℃以上,并稽留18~36小时。如稽留42小时以上,则必须攻毒(接种新鲜脾淋毒或冻干毒),攻毒后如果无反应,可判为定型热。
轻热反应(+) 潜伏期48~96小时,体温上升呈明显曲线,至少有2个温次升高0.5℃以上,并稽留12~36小时。
可疑反应(() 潜伏期48~96小时,体温曲线起伏不定,稽留不到12小时;或潜伏期在24小时以上,不足48小时及超过96小时至120小时出现热反应。
体温反应呈二次高峰,有一次高峰符合定型热反应(++) 或轻热反应(+)标准者,均须攻毒。攻毒后无反应时,该兔的热反应可判为定型热或轻热反应。
无反应(-) 体温正常。
结果判定:
接种疫苗后,当2只兔均呈定型热反应(++),或1只兔呈定型热反应(++)、另1只兔呈轻热反应(+)时,疫苗判为合格。
接种疫苗后,当1只兔呈定型热反应(++)或轻热反应(+),另1只兔呈可疑反应(();或2只兔均呈轻热反应(+)时,可在接种后7~10日攻毒。
攻毒时,加对照兔2只,攻毒剂量为50~100倍乳剂。每只兔耳静脉注射1.0ml。
攻毒后的体温反应标准如下:
热反应(+) 潜伏期24~72小时,体温上升呈明显曲线,升高1℃以上,稽留12~36小时。
可疑反应(() 潜伏期不到24小时或72小时以上,体温曲线起伏不定,稽留不到12小时或超过36小时而不下降。
无反应(-) 体温正常。
攻毒后,当2只对照兔均呈定型热反应(++),或1只兔呈定型热反应(++),另1只兔呈轻热反应(+),而2只接种疫苗兔均无反应(-),疫苗判合格。
接种疫苗后,如果有1只兔呈定型热(++)或轻热反应(+),另1只兔呈可疑反应(()或无热反应(-),可对可疑反应兔或无反应兔采用扑杀剖检或采心血分离病毒的方法,判明是否隐性感染;或接种疫苗后,2只兔均呈轻热反应,亦可对其中1只兔分离病毒。方法是:接种疫苗后96~120小时之间,将兔扑杀,采取脾脏,用灭菌生理盐水制成50倍稀释的乳剂(脾脏乳剂应无菌),或采取心血(全血),耳静脉注射2只兔,每只1.0ml。凡有1只兔潜伏期24~72小时出现定型热反应(++),疫苗可判为合
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